实验八 甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定

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1、实验八甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定（费林法）一、原理蔗糖的测定常以还原糖的测定为基础，样品经前处理后，加入稀盐酸，在加热条件下使蔗糖水解转化为还原糖，再以斐林试剂法测定试样水解后的总还原糖量（即食品中的总糖）及水解前的还原糖量（食品原有的还原糖），两者之差再乘以校正系数0.95即为蔗糖量。二、操作步骤：1、样品处理准确吸取10.00mL甘蔗汁移入100mL容量瓶中。缓慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置后过滤，弃去初滤液，收集滤液，即样品处理液。2、标定碱性酒石酸铜溶液（费林试剂）：（1）准确吸取5.00mL碱性酒石

2、酸铜甲液及5.00mL乙液，置于150mL锥形瓶中。（2）加水10mL，加入玻璃珠数粒。（3）从滴定管滴加约9mL葡萄糖（转化糖）标准溶液，2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，记录消耗葡萄糖标准溶的总体积。（4）同时平行操作三份，取其平均值。3、水解前样品中还原糖含量的测定：取样品处理液，按还原糖法测定水解前的还原糖含量。（同实验七）4、样品总糖量的测定：（1）吸取10.00mL样品处理液置于100mL容量瓶中。（2）加入6mol/L盐酸5mL，在68～70℃水浴加热15min。（3）迅速冷却后加2滴指示剂

3、，用20%NaOH中和（甲基红指示剂：溶液颜色由红变黄；酚酞指示剂：由无色变浅粉红色），加水至刻度，混匀，按还原糖法测定水解后的总还原糖含量。（同实验七）3三、实验记录及处理：碱性酒石酸铜溶液的标定10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖(转化糖)的质量mg。葡萄糖标准溶液蔗糖标准溶液（转化糖）标准溶液浓度ρ,mg／ml标定所耗标液的体积V，ml123平均123平均10mL碱性酒石酸铜相当于葡萄糖（转化糖）的质量F，mg公式:F1=ρ1×V1公式:F2=ρ2×V2/0.95食品中还原糖含量测定水解前（试样原有还原糖）水解后(总糖)试样量，ml稀释过程试样定容总体

4、积V，ml样液预测总消耗量V0，ml样液正式滴定总消耗量V1，ml123平均值123平均值测得还原糖含量，%公式：样品中还原糖含量R1，%总糖含量R2,%（以转化糖计）蔗糖的含量，%公式：蔗糖%=(R2-R1)×0.953四、说明及注意事项1.严格控水解条件以确保结果的准确性及重现性。2.其余注意事项同还原糖的测定。五、实验准备1、仪器：2、试剂：3、试剂配制附录：（1)碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。(2)碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4

5、g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。(3)转化糖标准溶液：准确称取经105℃烘干至恒重的纯蔗糖1.0000g，用100ml水溶解，置于三角瓶中，加6mol/L盐酸5mL，摇匀于68~70℃水浴中加热15min，取出，冷却至室温，加水定容至1000ml，摇匀。此溶液每1ml相当于1mg蔗糖，相当于1/0.95mg转化糖。(4）5mol/LNaOH：称取20gNaOH，溶于水中，稀释至100mI。（5）6mol/LHCl（1+1）：量取110ml浓HCl加入到100ml蒸馏水中，混匀。3