肝癌血清中岩藻糖结合蛋白的分离与鉴定

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1、肝癌血清中岩藻糖结合蛋白的分离与鉴定党刘毅，李铮(西北大学功能糖组学实验室，西安710069)摘要：［目的］分离并鉴定肝细胞癌血清屮的岩藻糖结合蛋白，并为新的癌症诊断标志物的发现提供新思路。［方法］利用岩藻糖功能化的磁性微粒进行岩藻糖结合蛋白的分离，并利用LC-MS/MS进行鉴定。［结果］健康人血清中分离并鉴定岩藻糖结合蛋白49种，肝癌患者血清中分离并鉴定岩藻糖结合蛋白45种，其中，健康人-与肝癌患者血清同时出现的蛋白为26种。通过非标记定量方法emPAI定量比较，有8种蛋白在肝癌中低表达，3种高

2、表达。［结论］本研究分离并鉴定了健康人和肝癌患者血清中的岩藻糖结合蛋片，同时，肝癌中高表达的糖结合蛋白可以作为肝癌诊断的潜在标志物。关键词：生物化学与分子生物学；肝癌；标志物；岩藻糖；糖结合蛋白中图分类号：Q513IsolationandIdentificationofFucose-bindingProteinsinSeraofHepatocellularCarcinomaDANGLiuyi,LIZheng(LaboratoryofFunctionalGlycomics,NorthwestUniv

3、ersity,Xi'an710069)Abstract:Currentbiomarkersusedclinicallystillsufferfrompoorsensitivityandspecificityinthediagnosisofhepatocellularcarcinoma(HCC).Therefore,newstrategyisstillneededfordiscoveryofbiomarkerinHCC・Methods:Hereastrategywasperformedforthei

4、solationandidentificationoffucose-bindingproteinsfromtheclinicalsera(60normaldonorsand60hepatocellularcarcinomapatients)bythefucose-magneticparticleconjugates-basedmethodandLC-MS/MSanalysis.Results:75proteinsfornormaldonorsand79proteinsforHCCcaseswere

5、identified,ofwhich26wereidentifiedinbothsamples.WiththeexponentiallymodifiedProteinAbundanceIndex(emPAI)quantification,8fucose-bindingproteinswereestimateddown-regulated(emPAIratio>2)and3MBPswereestimatedup-regulated(emPAIratio<0.25)intheHCCsera.Concl

6、usions:Fucose-bindingproteinswereidentifiedasup-regulatedintheHCCcouldbeservedaspotentialbiomarkerandthisresearchalsoprovidednewstrategyforthediscoveryofnewbiomarkers.Keywords:Biochemistrtyandmolecularbiology;HCC;Biomarker;Fucose;Glycan・bindingprotein

7、0引言原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一。山于起病隐匿，早期没有症状或症状不明显，进展迅速，确诊时大多数患者已经达到局部晚期或发生远处转移，治疗困难，预后很差。目前，临床上应用的肝癌诊断标志物，主要为甲胎蛋白(a-fetoprotein)，诊断灵敏度和准确性并不理想。因此，发现新的灵敏高效的诊断标志物对于肝癌的治疗意义重大。H，蛋白质组学已经成为发现癌症诊断标记物的有力工具。过去十年，血清和血浆是蛋白质组学研究的主要对象，但是其中高丰度和低丰度蛋白的浓度相差达10「其成分的复杂性对于新的癌症诊

8、断标志物的发现造成了严重影响严基金项目：教育部高等学校博上学科点专项科研基金(200806970018)作者简介：党刘毅(1986・),男，硕士研究生，主要研究方向：糖蛋白质组学通信联系人：李铮(1967-),男，教授，博上生导师，研究方向：蛋白质组E-mail:zhengli@nwu.edu.cn目前，以糖组学为基础的蛋白质组研究为肝癌标志物的发现提供了新思路。据推测，人类血清中超过一半蛋白质中都带有糖基化修饰「并口蛋白的糖基化的改变反映了某些疾病的发生和发展情况骂在肝癌的研究中