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1、山羊胚胎胃肠道细菌的分离与鉴定丁超1,郭海勇2,吴同垒】，王建1,钱爱东】(1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春130118；2.吉林师范大学生命科学学院，吉林四平136000)摘要：对不同妊娠日龄的山羊胚胎胃肠道细菌进行分离、纯化和培养，得到1()个细菌菌株，通过细菌培养特性、显微镜检、生化试验和16SrDNA基因序列测定及同源性分析，上述菌株的平均数量约为().8x1()2〜1.0x102CFU/g口分別属于葡萄球菌属(Staphylococcus)＞肠杆菌属(Enterobactersp.)芽胞菌属(Bacillus)和明串珠菌属(Leuconostoc)4个菌属。本研
2、究将为仑理开发利用哺乳动物胚胎时期胃肠道中微生物资源提供参考。关键词：羊胚胎；胃肠道；微生物菌群；16SrDNA中图分类号:S852.33IsolationandIdentificationofGastrointestinalBacteriaintheGoatEmbryosYUChaoi,GUOHaiyong2,WUTongleii,WANGJiam,QIANAidongi(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,JilinAgriculturalUniversity,ChangChun130118;2.CollegeofLifeScienc
3、es,JilinNormalUniversity,JiLinSiPing136000)Abstract:Theintestinalbacteriaisolatedfromgoatembtyosofdifferentdayswereidentificatedbybacterialcultivation,microscopy,biochemicaltest,sequencingof16srDNAandhomologyanalisis.TheresultsshowedthatthesebacteriamainlybelongedtoStaphylococcusspp.,Enterob
4、acterspp.,Bacillusspp.andLeuconostoc,andthenumberwasapproximate0・8x102〜1.Ox102CFU/g・Thisresearchmaybeprovidingascientificreferenceinthedevelopmentandutilizationofthemicrobialflorainthegoatembryos•Keywords:Goatembryo;Gastrointestinaltract;Microflora;16SrDNA0引言动物胃肠道屮栖息着大量微生物，它们与宿主的各项生理活动密不町分，形
5、成了动态平衡的微生态区系，对维持动物机体的生理功能、及免疫功能等方面起着重要作用并H影响动物体的生长、发育等生命活动。目前国内外对动物胃肠道正常菌群的研究报道主要集中在出生后期各阶段［卜3),对动物胚胎时期胃肠道正常菌群的研究报道很少，微生态学界普遍认为：消化道正常菌群的建立是在动物出牛Z后，而健康母体的子宫和胚胎的消化道是无菌的。林钧德等⑷在对不同妊娠口龄的猪胚胎、兔胚胎和小鼠胚胎胃肠道细菌的研究中发现这些动物的胃肠道细菌与一般健康动物胃肠道正常菌群相类似。郭海勇等［5］在小鼠、家兔胚胎胃肠道细菌多样性研究屮表明小鼠和家兔胚胎厉期胃肠道中存在细菌，具有多样件。本研究针对不同妊
6、娠口龄羊胚胎胃肠道细菌进行分离与鉴定，为揭示哺乳动物胚胎发育过程中消化道中正常菌群的种类、來源和分布规律，探讨其结构对正常生命活动的影响以及动物微生态制剂的研究提供科学参考。基金项目：国家自然科学基金项目(30871875)作者简介：于超，(1986・)，女，硕士研究生，主要研究方向：动物微生物学。通信联系人：钱爱东，(I960-),男，教授，博导，主耍研究方向：动物微生物学与免疫学。E-mail:qianaidongOl15@163.com1材料与方法1.1材料1.1.1试验动物辽宁绒山羊，选自某畜牧科学研究院育种试验绒山羊群。1.1.2主要仪器MLS-3020高压灭菌器、M
7、CV-131BNF无菌超净台、MOV-212电热恒温干燥箱（SANYO/日木），MoticBA-300数码生物摄像显微镜（口木）、电子分析天平（上海）、恒温培养箱、YQX-II厌氧培养箱（上海新苗）、MG254-PCR扩增仪（杭州朗基）。1.1.3培养基根据胃肠道正常菌群的特点，选用血清普通琼脂培养基、MRS琼脂培养妹、LBS琼脂培养基、BL琼脂培养基、丿犬氧琼脂培养基、Baird-Parker琼脂培养基（购自青岛海陳微生物试剂有限公司）,制备方法参照常规方法和市售培养基使用说明，完成厉分别
