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时间:2019-02-19
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1、广西大学硕士学位论文山羊瘤胃中降解单宁的细菌的分离、筛选及鉴定姓名:秦红玉申请学位级别:硕士专业:动物营养与鉰料科学指导教师:韦精卫20120523山羊瘤胃中降解单宁的细菌的分离、筛选及鉴定摘要单宁又称鞣酸,属于多元苯酚的复杂化合物,广泛存在于植物体内。我国南部地区香蕉种植量大,而香蕉茎、叶中单宁含量较高,造成动物的适口性差,影响其作为饲料的开发利用。但其中的单宁可通过微生物降解,通过观察发现,山羊可以采食利用较多的香蕉叶,因此推测山羊瘤胃中可能存在可利用或可降解单宁的菌株。为证明这一推测,并为以后利用微生物处
2、理香蕉叶,或者将单宁酶基因直接用于其他微生物或动物本身,来达到降解单宁的目的,本实验从原生态的广西隆林山羊瘤胃中筛选出几株好氧或兼性厌氧的单宁降解菌,用分子生物学方法鉴定菌株,并用三个浓度梯度的单宁培养基诱导菌株,进行单宁酶活测定,从而探讨山羊瘤胃内单宁降解菌的单宁酶活与单宁浓度之间的关系。研究结果如下:隆林山羊瘤胃中存在能够降解单宁的菌株,共分离出4株酶活较强的菌株NO.1、NO.2、NO.3、NO.4,分别为产碱普罗威登斯菌(Providenciaalcalifaciens)、Kerstersia、Prov
3、idenciaVermicola、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。四株菌对单宁的最大耐受度均可达到4%,在相同条件下,4株菌都能够产单宁酶,且单宁酶活力值均较高,其中Kerstersia的单宁酶活明显高于其他三株菌,而其他三株菌的酶活并无太大差异。经1%单宁浓度组诱导的四株菌的单宁酶活,普遍高于O.5%和1.5%单宁浓度组。以上结果表明,山羊瘤胃里面存在单宁降解菌,并且单宁酶的活力受单宁浓度的影响。单宁浓度过低,对菌株的诱导力较弱,使得单宁酶活力不高;而单宁浓度太高又会抑制菌的生长,
4、使得单宁酶活力很低。关键词:瘤胃单宁降解菌鉴定单宁酶ISOLj▲TION、SELECTIONANDIDENTIFICATIoNOFTANNIN-DEGRADINGBACTEIUAFROMTHERUMENOFGoATSABSTRACTTannin,whichbelongstocomplexcompoundsofmulti.phenol,existsinplantsextensively.LargenumbersofbananasarecultivatedintheSouthofChina,whilethereis
5、highercontentofTannininbananatree’sstemsandleaves,whichleadstopooranimalpalatabilitySOthatitinfluencesitsdevelopmentandutilizationasfeed.However,theTannininthemcanbedegradedbymicroorganism.ItisobservedthatgoatsCaningestanddigestthebananaleaves.Soitcanbeassum
6、edthatsomebacterialstrainsmayexistingoatlamenwhichcouldutilizeordegradeTannin.Itcouldbeutilizedtoprocessbananaleaves,orinordertodegradeTannin,tannasegenewouldbeutilizedinothermicrobesoranimalsdirectly.Inordertoprovethishypothesis,thisexperimentselectsoutafew
7、aerobicorfacultativeanaerobictannicdegradingbacteriafromrumensoforiginalgoatsinGuangxi,andidentifiesthebacterialstrainsbym01ecularbiologicaltechniques.ThreeTanninmediaofdifferentconcentrationgradientIIIareutilizedtoinducebacterialstrains,anddetectthetannasea
8、ctivity.TherebytherelationshipcanbefoundbetweenthetannaseactivityandconcentrationofTannindegradingbacteriainrumensofLonglingoats.Researchresultsasfollows:Thebacterialstrainsinrumensofgoats,which
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