临床医学毕业论文白色念珠菌临床株基因分型及耐药性研究

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1、XX大学毕业论文白色念珠菌临床株基因分型及耐药性研究姓名：2014年6月25日白色念珠菌临床株基因分型及耐药性研究作者：卓佳，陈柏坤，黄慧燕，徐瑜，张洪勤【摘要】目的:了解白色念珠菌的基因分型情况以及不同基因型白色念珠菌的药敏试验结果。方法：应用聚合酶链反应(PCR)扩增白色念珠菌25S核糖休DNA基因内含子区，可转座I型内含子插入片段的数目及大小的不同使得扩增产物不同，根据产物片段大小和数目分型。采用K-B法对不同基因型进行白色念珠菌药墩分析。结杲：临床分离的121株白色念珠菌经PCR分为三型:A型83株，B型27株，C型11株。A型为最常见的基因型，B

2、型、C型白色念珠菌对哇类抗真菌药物的耐药率显著高于A型菌株，对其他抗真菌药物的耐药率差异无显著性。结论:不同型别的£1色念珠菌耐约谱可能与特定基因型有一定相关性。【关键词】白色念珠菌PCR基因分型药敏分析Abstract:Objective:TounderstandthesituationofgenotypeandtheresultofdnigsusceptibilityofCandidaalbicansisolated・Methods:Polymerasechainreaction(PCR)designedtospantheregionthatinclu

3、dedthesiteofthetransposablegroupIintronof25SrDNAofCandidaalbicanswascarriedout.Thesizeoftheintronandpresenceofinsertionsegmentsinthe25SrDNAweredetectedbyagarosegclclcctrophorcsisofPCRproduct.K-Bmethodswascarriedoutforantifungalsusceptibilitytesting・Results:Atotalof121strainsofCand

4、idaalbicansweredividedintothreetypes:83genotypeAstrains,27genotypeBstrainsand11genotypeCstrains,genotypeAwasthemaingenotype.TheresultsoftheantifungalsusceptibilitytestingshowedthatstrainsofgenotypeBandCweresignificantlymoreresistantforazole-drugsthanstrainsofgenotypeA,nosatistical

5、lydifferencewasfoundamongotherantifungaldrngs.Conclusion:differenttypesofresistancespectrumforCandidaalbicansmayhaveacertainrelevancetoitsspecificgenotypes.Keywords:Candidaalbicans；PCR；Genotyping；Antifungalsusceptibility口色念姝菌广泛分布于口然界，也是人体的一种条件致病菌，正常人体的皮肤、口腔、肠道、肛门、阴道等处均可分离出该菌。近年来，随

6、着免疫抑制剂、介入性检杳治疗手段的广泛应用，肿瘤化疗、放疗，器官移植，艾滋病和社会老龄化等因索引起的免疫功能低下人群比例增高，临床真菌感染呈上升趋势，尤其是近年来抗真菌感染的治疗或者预防性治疗，导致真菌感染菌株及耐药趋势发牛变化［1］。本研究采用PCR分型方法，对临床分离的121株口色念珠菌进行基因分型，并对不同基因型白色念珠菌进行药物敏感性研究。1材料和方法1」菌株来源2006年7月至2008年3月间温州医学院附屈第二医院临床分离的121株片色念珠菌。标本來源于痰、咽拭子、生殖道分泌物、尿液、血液、粪便、腹水、伤口分泌物等。质控菌株为白色念珠菌ATCC6

7、0193,购自卫生部临床检验屮心。1.2仪器和试剂法国科玛嘉显色培养基(CHROMagarCandida).API20CAUX系统购自法国生物梅里埃公司；沙保弱琼脂培养基、玉米■吐温80培养基、含2%葡萄糖和0.5

8、ig/mL美兰的M-H琼脂培养基、YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)：酵母粉10g,蛋白月东20g,葡萄糖20g,蒸傅水1000mL,pH6.0(自制)；2%蜗牛酶；原生质缓冲液:lmol/Llh梨醇，0.02mol/L柠檬酸，0.02mol/L磷酸氢二钠，pH5.8；SE缓冲液：1mol/Lill梨醇,0.0625mol/LEDTA,pH

9、8.0；丹麦ROSCONeo-Sensitab抗真菌药敏纸片：制霉