临床微生物SOP-标本处理标准操作规程

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1、1.目的：规范标本处理标准操作规程。2.适用范围：临床微牛物标本。3.职责：微主物检验人员严格执行本程序。4.程序：4.1血液标本接收标本后，立即对标本进行编号、登记。门诊病人要同时登记住址、电话等信息。将血培养瓶置于全口动血培养仪中培养。4.2痰标本4.2.1接收编号、登记后的痰标本，加入痰消化剂或无菌生理盐水处理。4.2.2用无菌棉签挑取标本分别涂布于血琼脂平板、麦康凯平板的第一区，然后接种划线笫二、笫三……4.2.3同时做痰涂片镜检。4.3咽拭子标本涂布血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板的第一区，然后接种划线笫二、

2、笫三……4.4脑脊液、胸腹水等穿刺液床边抽取体液标本1〜加1注入血培养瓶或用无菌容器，立即送实验室。接收标本后，立即标本进行编号、登记、置培养箱培养。脑脊液标本需离心涂片检查。4.5粪便或肛拭标本接收标本后，立即对标本进行编号、登记，取粪便脓血部位标本根据中请单要求选择平板，立即接种。4.6尿标本接收标本后，立即对标本进行编号、登记，将尿标本混匀，定量接种血平板，分离细菌和菌落计数。5临床常见标本处理5.1标本接种及培养见下表常见标本接种及培养标本平板环境痰、咽拭子血平板.MC35°C有氧分泌物、其它标本血平板35°C有

3、氧血、骨髓、胸水（需增菌）、CSF（需增菌）需氧培养血•液增菌液瓶厌氧培养：血液增菌液放入BACTEC尿一般培养血平板35°C有氧L菌培养①L型细菌增菌液②血平板大便一般培养SS平板35°C有氧真菌培养MC平板35°C冇氧厌氧培养厌氧平板35°C厌氧袋屮脑脊液培养①血平板35°C有氧②巧克力平板35°CCO2环境备注联系电话：806058187106094.2操作方法:按上表根据标本及检测目的选择不同的培养基进行相应的种。5.3分区划线法：用棉签或接种环将标木涂布于原划区，接种环在酒精灯上消毒灭菌后划一区线，每区划线前均

4、灭菌接种环。适用于痰、咽、脓、分泌物等标本的接种。四区5.4棋盘划线法：将标本涂布于原划区后再划出第一线（1-2根），接种环灭菌后划笫二线（4-6根），接种环灭菌划第三线（3-5根），接种环灭菌后划第四线（左右对称，各4-6根）。适用于大便、肠拭子、丿扛周拭子等标木的接种。原划区第四组线5.5定量培养法：将标准10M钳环浸于混匀尿中，缓慢、垂直取出而得到边缘扁平的一钠环量尿（或直按用10ul定量加液器取10ul混匀床），将环触于血平板屮部，迅速直线推动环至平板一边，再距平板中心lcni沿同样路线折回，快速地从一边滑动到另

5、一边，均匀接种平板的上2/3部分。应避免耽搁，以免液体干燥而不能均匀接种。最后，用未烧灼的接种环末梢在平板上剩下的1/3部分呈之字形接种，勿接触已接种部分。适用于小便、体液标本的接种。6.1接种环消毒灭菌后要待冷却后方能接触标本或划线。接种过程应严格遵循“冇菌观点，无菌操作”。6.2咽拭子标本由于标本量少，在分区划线时可连续划线而不必灭菌接种环。4.3未作消化或均质化的痰标木在接种吋应注意采用搅样方式取粘痰脓血部分，分区划线时，适当壇加区与区之间的交叉线，并注意接种环的灭菌。6.4CSF、胸腹水、胆汁、腹透液等体液标本在

6、接种时用接种环取二满环接种血平板，必耍时用无菌试管离心后取沉淀接种。对于澄清的体液标本分区划线时可连续划线而不必灭菌接种环。6.5尿液标木接种前一定要充分混匀，接种吋注意定量接种环或加样器吸头屮不要有标本遗留，划线时要快。整个接种过程不能灭菌接种环。4.6带粘液脓血的大便标木在棋盘划线时应注意划每组线前灭菌接种环。6.7骨伤科标本疑为气性坏疽时，标本的接种方法见〈厌氧菌标准操作规程〉中焦性没食酸法。6.8阴道分泌物、尿道分泌物、尿液标木、眼分泌物等要求做淋球菌培养吋，需事先将血平板和不含万占霉素的巧克力平板在37°C孵箱

7、中预温30min后再接种。6.9标本接种完毕后应尽快放入相应环境中培养。参考文献[1]周庭银编著•临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007⑵叶应妩，王毓三，中子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学出版社，2006编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓名：XX编写日期：2011-05姓名：XXX复审日期：2011-06姓名：XXX批准日期：2011-062011-07