临床微生物sop-生殖道标本细菌学检验标准操作规程

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1、XXXX医院检验科微生物实验室生殖道标本细菌学检验标准操作规程编号:MYCH/版本:第1版第0次修改页数:第4页共4页生殖道标本细菌学检验标准操作规程1.目的规范生殖道标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。2.适用范围生殖道标本培养或涂片检查。3.标本3.1标本类型生殖道标本。3.2标本采集3.2.1女性由临床医师用无菌棉拭采集阴道、宫颈分泌物。怀疑盆腔厌氧菌感染时,由医师用注射器从阴道后穹处穿刺抽取标本,立即床边接种于厌氧菌平板。3.2.2男性翻转包皮,用肥皂水清洗尿道口,清水冲洗,采集尿道口分泌物。采

2、集前列腺液时,先冲洗尿道和膀胱,用手指从肛门内按摩前列腺,使前列腺液溢出。3.2.3梅毒螺旋体标本从外生殖道的硬下疳处蘸取渗出液,置于载玻片上,加盖玻片后立即送检。3.3标本拒收标准3.3.1申请单项目与标本不符。3.3.2标本不是用无菌容器留取。4.试剂、仪器4.1革兰染液、氧化酶试剂、3%过氧化氢、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。4.2VITEK鉴定系统;革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性细菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)

3、、药敏纸片、ATB板条等,有效期及储存条件参见试剂说明书。4.3接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、C02培养箱等。5.细菌鉴定和药敏质控XXXX医院检验科微生物实验室生殖道标本细菌学检验标准操作规程编号:MYCH/版本:第1版第0次修改页数:第4页共4页生殖道标本细菌学检验标准操作规程参见《质量管理程序》。6.检验步骤接收标本后,立即对标本进行编号、登记。6.1涂片检查6.1.1革兰染色镜检观察阴道分泌物中有无细菌,以及细菌形态和染色性,尤其注意观有无白细胞内外的革兰阴性双球菌(淋病奈瑟菌),以及有无覆盖大

4、量革兰阴性菌的上皮细胞(线索细胞,提示可能有阴道加特纳菌感染)。6.1.2梅毒螺旋体涂片检查直接暗视野检查,观察有无纤细、发亮、前后旋转的密螺旋体,或冯泰纳染色,观察有无棕黑色的密螺旋体。6.2分离培养6.2.1一般细菌培养接种血琼脂平板和麦康凯琼脂平板,置5%~10%CO2环境条件下,35℃培养18~24小时。6.2.2病奈瑟菌培养接种于GC琼脂平板,置5%~10%CO2条件下,35℃培养18~24小时,察有无较小、灰白色、露滴状菌落形成,进一步生化鉴定。6.2.3阴道加德纳菌培养接种于含5%羊血琼脂平板,在5%~

5、10%C02环境培养48小时,观察有无针尖大小(0.3~0.5mm)、圆形、光滑、不透明、不溶血(在人血或兔血琼脂平板上可出现β溶血)的菌落。6.2.4结核分枝杆菌培养参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。7.操作流程生殖道标本厌氧培养需氧培养涂片染色XXXX医院检验科微生物实验室生殖道标本细菌学检验标准操作规程编号:MYCH/版本:第1版第0次修改页数:第4页共4页生殖道标本细菌学检验标准操作规程厌氧血琼脂平板,35℃厌氧环境培养18~24h血琼脂平板、麦康凯平板35℃培养18~24h淋球菌平板,35℃,5%~10%

6、CO2培养18~24h耐氧试验观察菌落特征及涂片、染色厌氧血平板生长仪器或手工细菌鉴定及药敏试验发出报告8.结果报告报告菌名和抗菌药物药敏试验结果。9.注意事项取阴道分泌物之前避免性生活、阴道冲洗和用药。10.临床意义正常的内生殖道是无菌的,而外生殖器(包括男性尿道口和女性阴道)有多种细菌寄生,如尿道口常见有葡萄球菌、类白喉棒状杆菌和非结核分枝杆菌等,阴道常见有乳酸杆菌、双歧杆菌、消化球菌等。查见病原菌提示有细菌感染,如急、慢性前列腺炎,睾丸炎,附睾炎,阴道炎,急、慢性淋病等。常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、淋病

7、奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌等。参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008[2]XXXX医院检验科微生物实验室生殖道标本细菌学检验标准操作规程编号:MYCH/版本:第1版第0次修改页数:第4页共4页生殖道标本细菌学检验标准操作规程周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:上海科学技术出版社,2007[3]叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京:东南大学出版社,2006[4]MurrayPR.M

8、anualof.ClinicalMicrobilogy.9thed.Washington;ASMPress,2007[5]IS015189:2007医学实验室一质量和能力认可准则.2007编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓名:XX编写日期:2011-05姓名:XXX复审日期:2011-06姓名:XXX批准日期:2011-062011-07

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