探讨常见临床标本的微生物检验程序

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1、探讨常见临床标本的微生物检验程序探讨常见临床标本的微生物检验程序杨雪梅黑龙江省大庆二医院检验科,黑龙江大庆163000[摘要]目的探讨常见临床标本的微生物检验程序。方法以白色念珠菌为说明z建立白色念珠菌临床标本的检验程序和检验方法。结果将白色念珠菌置于沙氏葡萄糖的培养基中,在35°C时的生长状态较好;置于显色培养基上25°C时的生长较为缓慢且菌落为乳白色,而35弋时的生长状也良好且菌落为浅绿色;置于吐温80■玉米粉培养基、氯化三苯四氮呼-沙保罗琼脂培养基中生长则较为缓慢。白色念珠菌蔗糖发酵试验呈阴性,麦芽糖、葡萄糖发酵试验

2、呈阳性,尿素分解试验呈阴性。结论各微生物在生化特性中各有不同,但是在检验程序中方式是基本相同的,行标本分离、菌种鉴定、药敏试验这三个步骤缺一不可,按部就班的进行。[关键词]常见临床标本;白色念珠菌;微生物检验程序[中图分类号]R446[文献标识码]A[文章编号]1672-5654(2013)04(b)-0151-02临床微生物检验程序涵盖着三个步骤”分别是标本分离、菌种鉴定、药敏试验,在此之中,菌种鉴定过程中的速度是对微生物检验过程快慢的起着决定因素[1]。白色念珠菌,又名白假丝酵母菌,是一种条件致病菌。患者在感染白色念珠

3、菌后会引起鹅口疮、心内膜炎、肺炎、脑膜炎甚至败血症等疾病[2]。临床微生物检验技术为临床医学中的重要内容,所以本为以白色念珠菌为例进行对微生物检验程序进行了解。1资料与方法11一般资料菌株种类为氯化三苯四氮坠沙保罗琼脂培养基、麦芽糖、蔗糖、孚I;糖、葡萄糖发酵培养基和血培养基、吐温80-玉米粉培养基[引。1.2方法首先要制备菌液,挑取斜面培养基中培养的新鲜培养物然后接种至液体沙氏葡萄糖的培养基中”放置在25°C中培养24或者48小时后,将菌液稀释成30〜100cfu/mLo其次取ImL的菌液分别放置在沙氏葡萄糖琼脂培养基、

4、氯化三苯四氮呼-沙保罗琼脂培养基以及吐温80■玉米粉培养基,同时在不同的温度即25°C、35°C.38°C下,培养1、2、3、4、5d后,计数活菌数量并且进行比较。挑选吐温80-玉米粉培养基、氯化三苯四氮醴■沙保罗琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基中的菌落接种在显示培养基中,在25弋培养24h后,观察其显色情况同时利用显微镜观察它们的菌落形态。挑选吐温80■玉米粉培养基、氯化三苯四氮輕■沙保罗琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基中的菌落行生化试验(尿素分解试验、糖发酵试验X2结果白色念珠菌在沙氏葡萄糖培养基中,在35X:时生长状

5、态较好,活菌数高于在25°C培养条件下的活菌数。在沙氏葡萄糖培养基中,白色念珠菌的菌落呈现乳白色圆形、大小在5pm左右,比较粘稠,菌落中央有突起。革兰氏染色呈现阳性,菌体为不均匀着色,芽管与假菌丝不清晰。白色念珠菌在显色培养基中在35艾时生长良好,菌落为浅绿色z随着生长时间上的延长,菌落的颜色还可逐渐加深至绿色;在25。(:时生长较慢”菌落为乳白色而且较小。热带念珠菌菌落为蓝绿色,随生长时间的延长可逐渐加深至深蓝色。白色念珠菌在吐温80-玉米粉培养基中生长较为缓慢,在显微镜下可以见到大量假菌丝及厚膜抱子。白色念珠菌在氯化三

6、苯四氮呼■沙保罗琼脂培养基中生长也是较为缓慢,菌落较小。白色念珠菌在血培养基上生长迅速,在显微镜下也可以见到大量的假菌丝以及厚膜抱子。使用显微镜观察白色念珠菌经革兰氏染色后的白色念珠菌,菌体呈着色不均,可以看见厚膜抱子及模糊不清的假菌丝。利用显色培养基可以将酵母菌与假丝酵母菌进行区分,同时还可将白色念珠菌与热带、克柔、光滑酵母菌互相鉴别[4]。生化检验结果显示,白色念珠菌葡萄糖、麦芽糖发酵试验呈阳性,蔗糖发酵试验呈阴性,尿素分解试验呈阴性;热带念珠菌麦芽糖、葡萄糖、蔗糖发酵试验呈阳性,尿素分解试验呈阴性。3结语各学科间随着

7、现代医学和相关科学技术的不断发展而相互交叉和渗透,在细胞、分子和基因水平领域已经有医学微生物学检验技术已深入,许多的新技术和方法均已广泛应用于临床微生物实验室。有效利用微生物学检验技术,对临床标本中的微生物快速准确的检验和鉴定,并对有可能弓I起感染的微生物实施耐药性监测,为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及硏究等提供科学的依据是医学微生物学实验室的基本任务之一。各种细菌都具有自己独特的酶系统,因此对底物的分解能力也不同,其代谢产物也会不同[5]。对这些代谢产物利用生物化学方法进行测定,可对细菌的种类进行区别和鉴定。

8、这种利用生物化学方法来鉴别不同的细菌,称为细菌的生物化学试验或称为生化反应。医学领域中新进展不断,检验科学也在逐渐进步,新的治疗技术、诊断技术层出不穷。检验结果的可靠性和临床医生的治疗和诊断有着密不可分的关系,所以应加强标本采集、保存、分离、鉴定等方面的控制。在实验室内质量控制时核心,是提高技术水平和检

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