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1、冻融胚胎移植技术应用临床药学论文作者：王晓红，罗亚宁，李丽，杨艳红，闫凯麟，黄剑磊，闵保华【关键词】冻融【摘要】目的：研究冻融胚胎移植的临床应用及分析影响冻融胚胎移植妊娠率的相关因素.方法：对63例80个冻融胚胎移植周期进行回顾性分析，通过IVF或ICSI获得的剩余胚胎釆用慢速法冷冻保存，快速法解冻复苏.结果:解冻392个胚胎，成活269个胚胎，胚胎复苏率为68.62%.周期临床妊娠率为23.75%.每周期植入3个胚胎组的临床妊娠率显著高于植入三2个胚胎组(Z2=4.98,P0.05).妊娠周期胚胎细胞完整率及优质胚胎率显著高于非妊娠周期(67.2
2、8%vs60.09%,89.09%vs73.55%,均为P0.025).结论：冻融胚胎移植的成功率与移植胚胎的数量和质最密切相关.【关键词】冻融；冷冻胚胎；胚胎移植；妊娠率0引言胚胎冷冻技术是将胚胎放入冷冻保护剂屮，在超低温坏境屮保存，需要时再将胚胎解冻复苏的技术，它是"试管婴儿"即体外受精—胚胎移植(invitrofcrtilizationandcmbryotransfcrJVFET)技术的—项重要衍生技术.在本牛•殖医学中心200309/200412间共接受1VF或单楷子卵母细胞质内显微注射(intracytoplasmicspcnninjcc
3、tion,ICSI)技术助孕治疗的不孕症患者63例，80个冻融胚胎移植治疗周期，80个冻融胚胎移植治疗周期中来自IVF71个周期，ICSI9个周期，报道如卜11材料和方法1」材料冷冻胚胎来源：促超排卵、取卵、体外受精及胚胎培养，均按木中心操作常规进行，于取卵术后48〜72h将2〜3个新鲜胚胎移植入了宫腔.剩余的存活胚胎(FiglA),采用慢速法冷冻保存，快速法解冻复苏［1］」.2方法121胚胎冷冻冷冻液CryoPBS：含25g/L人血清白蛋片的磷酸盐缓冲液(PBS+25g/LHAS)；FSl:1.5mol/L丙二醇+CryoPBS;FS2:1.5m
4、ol/L丙二醇+0.1mol/L蔗糖+CryoPBS.冷冻液及解冻液均来白瑞典Vitrolife公司.在四孔培养皿1,2,3,4号孔中分别加入lmLCryoPBS,FSl,FS2,FS2,室温平衡.将胚胎放入CryoPBS2-5min后，放入FS1保持10min,再将胚胎放入FS2后装入麦管并封口.将麦管放入冷冻仪(PlanerKryo360L7,英国)开始冷冻程序：从18°C起，以2°C/min逐渐降温至・7°C,此时用液氮浸透的棉签在麦管接近棉塞的部位进行植冰(seeding),然后以0.3°C/min缓慢降温到・30°C,再快速降温至-100
5、°C程序结朿，迅速収出麦管，放入液氮罐(-196°C)保存」22胚胎解冻解冻液TSl:1.0mol/L丙二醇+0.2mol/L蔗糖+CryoPBS;TS2:0.5mol/L丙二醇+0.2mol/L蔗糖+CryoPBS;TS3:0.2mol/L蔗糖+CryoPBS.将解冻液TS1,TS2,TS3及CryoPBS分别按顺序加入四孔培养皿屮，从液氮罐屮拿出麦管，室温卜•解冻30s后，放进30°C水浴屮30s.剪去一-端或拔掉塞子，接上麦管操作器，然后再剪去另一端，小心地将胚胎吹入TS1中，在TS1中孵育5min,移入TS25min,再移入TS3中5〜lO
6、min,将胚胎放进CryoPBS,37°C下保持lOmin.最示将胚胎放入培养液中培养2〜12h,检查胚胎存活率并记录胚胎形态，有半数以上的分裂球存活的胚胎可以移植(FiglB).123冻融胚胎移植(FET)时机选择①自然周期(naturalcycles)：规律月经有排卵的患者一般选择在自然周期进行FET.在预计排卵口前3〜4d行黄体生成索(LH)测定，同时B超监测卵泡发育和排卵，排卵后2〜3d或LH峰出现4d后彳亍FET.②激素替代周期(hoimonereplacetreatment)：雌激素水平低下的无排卵的患者在激素替代周期内进行FET.从月
7、经周期或撤退性出血的第2〜3日起，戊酸雌二醇2〜8mg/d,po,10〜14<1后B超监测子宫内膜厚度，当子宫内膜厚度我mm时，开始加用黄体酮60〜100mg/d,给予黄体酮4d后，解冻胚胎并FET.③促排卵周期(ovarystimulationcyclcs):刀经稀发或J1经不规律的患者，可给予克罗米芬(CC)或人绝经尿促性腺激素(HMG)促排卵治疗，阴道B超监测卵泡发育，当主导卵泡直径218mm时给了hCG5〜10kU,im.排卵后2〜3d或注射HCG后84h行FET.1.2.4妊娠监测于移植后15d查尿或血HCG,若阳性则丁•停经7wk行B超
8、检查，见孕囊及原始心管搏动诊断为临床妊娠，继续随访至妊娠结束.统计学处理：年龄、不孕时间、移植胚胎数等定量资料以x±s表示
