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1、人类冻融胚胎移植技术的临床应用 【Abstract】AIM:Tostudytheclinicalapplicationoftransferringfrozenthabryosandtoanalyzethefactorsinfluencingtheouteoffrozenthabryostransfer(FET).METHODS:EightyFETcyclesin63casesfromSeptember2003toDecember2004beraryembryosobtainedfrominvitrofert
2、ilization(IVF)orintracytoplasmicsperminjection(ICSI)ethod.RESULTS:Tbryossurvived,bryosurvivalrateof68.62%.Thepregnancyratebryosthanthatoftransferring≤2embryos(30.91%vs8%,P<0.05).Thereoftherateofcleavageintegralityandthepercentageofqualityembryos(67.28%vs
3、60.09%,89.09%vs73.55%,respectivelyP<0.025).CONCLUSIONS:Thenumberandqualityoffrozenthabryostransferredarethemostimportantfactorsinfluencingthepregnancyrateafterfrozenthabryotransfer. 【Keybryocryopreservation;embryotransfer;pregnancyrate 【摘要】目的:研究冻融胚胎移植的
4、临床应用及分析影响冻融胚胎移植妊娠率的相关因素.方法:对63例80个冻融胚胎移植周期进行回顾性分析,通过IVF或ICSI获得的剩余胚胎采用慢速法冷冻保存,快速法解冻复苏.结果:解冻392个胚胎,成活269个胚胎,胚胎复苏率为68.62%.周期临床妊娠率为23.75%.每周期植入3个胚胎组的临床妊娠率显著高于植入≤2个胚胎组(χ2=4.98,P<0.05).妊娠周期胚胎细胞完整率及优质胚胎率显著高于非妊娠周期(67.28%vs60.09%,89.09%vs73.55%,均为P<0.025).结论:冻
5、融胚胎移植的成功率与移植胚胎的数量和质量密切相关. 【关键词】冻融;冷冻胚胎;胚胎移植;妊娠率 0引言 胚胎冷冻技术是将胚胎放入冷冻保护剂中,在超低温环境中保存,需要时再将胚胎解冻复苏的技术,它是“试管婴儿”即体外受精―胚胎移植(invitrofertilizationandembryotransfer,IVFET)技术的一项重要衍生技术.在本生殖医学中心200309/200412间共接受IVF或单精子卵母细胞质内显微注射(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)技术助孕
6、治疗的不孕症患者63例,80个冻融胚胎移植治疗周期,80个冻融胚胎移植治疗周期中来自IVF71个周期,ICSI9个周期,报道如下. 1材料和方法 1.1材料 冷冻胚胎:促超排卵、取卵、体外受精及胚胎培养,均按本中心操作常规进行,于取卵术后48~72h将2~3个新鲜胚胎移植入子宫腔.剩余的存活胚胎(Fig1A),采用慢速法冷冻保存,快速法解冻复苏[1]. 1.2方法 1.2.1胚胎冷冻冷冻液CryoPBS:含25g/L人血清白蛋白的磷酸盐缓冲液(PBS+25g/LHAS);FS1:1.5mol/L丙二
7、醇+CryoPBS;FS2:1.5mol/L丙二醇+0.1mol/L蔗糖+CryoPBS.冷冻液及解冻液均来自瑞典Vitrolife公司.在四孔培养皿1,2,3,4号孔中分别加入1mLCryoPBS,FS1,FS2,FS2,室温平衡.将胚胎放入CryoPBS2~5min后,放入FS1保持10min,再将胚胎放入FS2后装入麦管并封口.将麦管放入冷冻仪(PlanerKryo3601.7,英国)开始冷冻程序:从18℃起,以2℃/min逐渐降温至-7℃,此时用液氮浸透的棉签在麦管接近棉塞的部位进行植冰(seedin
8、g),然后以0.3℃/min缓慢降温到-30℃,再快速降温至-100℃程序结束,迅速取出麦管,放入液氮罐(-196℃)保存. 1.2.2胚胎解冻解冻液TS1:1.0mol/L丙二醇+0.2mol/L蔗糖+CryoPBS;TS2:0.5mol/L丙二醇+0.2mol/L蔗糖+CryoPBS;TS3:0.2mol/L蔗糖+CryoPBS.将解冻液TS1,TS2,TS3及CryoPBS分别按顺序加入四孔