angptl4影响肝癌转移机制

《angptl4影响肝癌转移机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、上海交通大学博士学位论文l帅Y帆2呲5眦2吣眦4叭8帆6m1帅ANGPTL4影响肝癌转移的机制作者姓名：指导教师：学科专业：研究方向：申请学位：学号：答辩日期：培养单位：李红李锦军研究员肿瘤学肿瘤分子生物学博士00775593102010年5月10日上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室关键词：ANGPTL4，肝癌，转移，缺氧，VCAM～1资助基金项目：上海市自然科学基金(08ZRl418300)上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。

2、除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：色≯日期：207口年牛月2／日上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段

3、保存和汇编本学位论文。保密回，在—苎年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。(请在以上方框内打“4")学位论文作者签名：南y指导教师签名：错旁日期：沙Io年午月≥1日日期："2,o／。年够月叫日ANGPTL4影响肝癌转移的机嘲中文摘要ANGPTL4影响肝癌转移的机制摘要肝癌是全世界第五位高发的恶性肿瘤，已日益成为全球性人类健康的威胁。肝癌患者的总体生存率还很不理想，是因癌症相关性疾病死亡的第三位病因。复发和转移是导致肝癌患者术后生存率低的主要原因，越来越多的证据表明肿瘤转移是一个受多基因多因素影响的过程。ANG

4、PTL4是血管生成素(Angiopoietin)家族的成员之一，它不仅对糖脂代谢起到重要的调节作用，而且与血管新生、肿瘤生长和转移有着密切的关系。目前，关于ANGPTL4对血管新生和肿瘤转移影响的研究结果并不一致，尚存在很多争议，提示着ANGPTL4的活性可能存在组织依赖性。迄今未见有关ANGPTL4在肝癌转移中的功能及机制的报道。因此我们致力于研究ANGPTL4在肝癌转移中的功能和作用机制，补充人们对ANGPTL4基因功能的认识，并为ANGPTL4用于肝癌的诊断或治疗奠定实验基础。本研究中，我们采用慢病毒载体构建了

5、ANGPTL4稳定过表达肝癌细胞系Huh7．1enti—ANGPTL4和SMMC．7721．1enti—ANGPTL4。体外功能实验表明，与相应的对照组相比，Huh7．1enti-ANGPTL4和SMMC．7721．1enti．ANGPTL4细胞具有更强的跨血管内皮细胞迁移的能力；用含上海交通大学上海市肿瘤研究所博士论文1ANGPTL4影响肝癌转移的机制中文摘要ANGPTL4蛋白的条件性培养上清分别处理Huh7和SMMC．7721细胞，同样能够促进它们的跨血管内皮细胞迁移的能力；裸小鼠体内肝原位接种试验证实SMMC．

6、7721．1enti．ANGPTL4与其对照组相比，肝内转移灶、肺转移发生例数以及肺转移灶显著增多(p：0．05)。在ANGPTL4相对高表达的肝癌细胞系MHCC一97L中，采用shRNA方法干扰ANGPTL4的表达，能明显抑制MHCC．97L细胞的跨血管内皮细胞迁移(氏0．01)；用ANGPTL4抗体处理MHCC．97L细胞，能够抑制其跨血管内皮细胞的迁移。以上结果表明，外源性表达ANGPTL4和内源性的ANGPTL4均能增强肝癌细胞的跨血管内皮细胞迁移能力并促进肝原位瘤模型裸小鼠的肝内转移和肺转移。进一步探讨AN

7、GPTL4的作用机制时，发现分泌性ANGPTL4蛋白能够上调人脐静脉血管内皮细胞(mⅣEC)中VCAM-1mRNA和蛋白的表达。采用siRNA技术在HUVEC细胞中干扰VC删．1或在SMMC一7721-lenti-ANGPTL4细胞中干扰整合素p1(Integrinbeta1)，均能抑制过表达ANGPTL4诱导的SMMC一7721细胞的跨血管内皮细胞的迁移。缺氧与多种实体瘤的病程进展和肿瘤转移密切相关。本研究证实了肝癌细胞系在缺氧环境(2％02)下培养能明显上调ANGPTL4mRNA和蛋白的表达。采用siRNA方法研

8、究证实在MHCC一97L和SMMC．7721细胞中缺氧是通过转录因子HIF．1a而不是HIF．2a来上调ANGPTL4的上海交通大学上海市肿囊研究所博士硷文2ANGPTL4影响肝癌转移鸶机制表达。在缺氧培养的细胞培养基中加入ANGPTL4抗体，能部分抑制缺氧诱导的肝癌细胞的跨血管内皮细胞迁移。同时还发现HIF—la抑制剂2ME2能够有效抑制缺氧