探究课题DNA的粗提取和鉴定-教育在线博客

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1、探究课题DNA的粗提取和鉴定-教育在线博客探究课题：DNA的粗提取和鉴定一、课题分析1.教学冃标（1）初步学会DNA的粗提取和鉴定的方法，领悟该实验的实验原理。（2）如实观察并记录实验现象和结果，培养学生求实、严谨的科学态度。（3）分析实验过程中出现的问题，培养学牛分析问题和解决问题的能力。（4）通过分组实验，培养协作意识和合作能力。2.背景描述核酸是存在于细胞中的一种酸性物质，凶为它呈现酸性，所以叫核酸。核酸是细胞的核心物质，是细胞里最重要的生命人分子之一，是支配生命从诞生到死亡的根源物质，主宰着细胞的新陈代谢，被现代科学称为“生命之源”、“生命Z本”。核酸是1868年瑞士医生米歇尔（F

2、.Miescher）发现的。20世纪20-30年代确认自然界核酸有DNA和RNA两类，是由核苻酸组成的。40年代以后实验的事实使人们対核酸的功能和结构两方面的认识都有了长足的进步。1928年，英国科学家格里菲思（F.Griffith）用肺炎双球菌在小鼠身上进行转化实验，证明被加热杀死的S型细菌中存在一种促成无毒性的R活细菌转化成冇毒性的S型细菌的转化因子；1944年，美国科学家（0.Avery）等证明了肺炎球菌转化因子是DNA；1952年A.D.Hershey和M.Cha-se用DNAS和P分别标记T2噬菌体的蛋白质和核酸，感染人肠杆菌的实验进一步证明了DNA是遗传物质；1953年Wats

3、on和Crick提岀的DNA双螺旋结构模型，这是20世纪生物科学最伟大的成就，标志着现代分了生物学的诞生。那么DNA是什么样的物质呢？本实验就是将组织细胞中的DNA提取出來，然后进行观察和鉴定。首先利用渗透原理将组织细胞破裂，释放出其小的DNA,由于DNA在NaCl溶液屮的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14ni01/L时，DNA的溶解度最低。利丿IJ这一原理，可以把主要分布在组织细胞核中的DM在NaCl溶液中析出來。因DNA不溶丁•酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶丁•酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。由于DNA中喋

4、吟核甘酸上的脱氧核糖遇酸生成3-號基-丫酮基戊醛，它再和二苯胺作用而显现蓝色（溶液呈蓝色）,且蓝色的深浅与DNA含量的多少冇关。因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二.材料器具鸡血细胞液（每组5〜10mL）；烧杯（lOOmL,1个，50mL,500mL,各2个），漏斗，试管（20mL,2个）,玻璃棒，滴管，量筒（100讥，1个），纱布，银子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管架，试管夹，火柴。蒸慚水，体积分数为95%的冷酒精，质量浓度为0.lg/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液,二苯胺试剂。二.教学建议木实验的重

5、点是通过颜色反应定性地验证牛物组织中的DNA成分，让学牛学会DNA的粗提取13532和鉴定的操作方法。难点是领悟该实验的设计思想，培养学生科学的研究态度，提高学生的实验操作能力、观察能力和设计能力。1.教学方法根据实验内容，建议教师采用探究性实验和验证性实验和结合的教学方法。在实验时可将学生分成若干个小组，分别选择不同的实验材料，如鸡血、新鲜菜花等，让学生找出该实验理想的实验材料，以充分体现学生为主体性，调动学生的实验兴趣、激发学生的创新意识。2.注意事项①鸡血、植物组织（菠菜菜叶、菠菜菜花、蒜黄菜花等）材料要新鲜；②将鸡血细胞液与蒸懈水混合以后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞

6、快速破裂，以便将鸡血细胞核中的DNA释放；③用95%酒精溶液进一•步提取含杂质较少的D7A时，95%酒精溶液必须在冰箱中至少放24h,因为使用冷却的酒精，対DNA的凝集效果较佳；④溶解细胞核中的DYA、将含DNA的黏稠物再溶解、提取含杂质较少的DNA时，都要用玻璃棒搅样，使用时玻璃棒不要碰到烧杯底，要注意各步骤屮搅拌的方法；⑤在DNA的鉴定小，所用的二苯胺是一种有毒性的试剂，使用时要注意不能让药液接触到皮肤或身体的其他部位，也不要近距离观察；⑥严格按照规范的方法步骤去操作。3.课前准备（1）准备好实验材料：新鲜的鸡血细胞液，新鲜的菜花、菠菜、蒜黄和菠菜等。鸡血细胞液是由活鸡的鲜血经沉淀后获

7、得。每组（2个学生）需用5ml鸡血细胞液，每班（50）至少130mL,鸡血细胞液与鸡血的体枳比为1：3,这样每班至少需要390niL鸡血细胞液。宰杀1只中等人小的活鸡，一般可得120汕左右的鲜血，因此一个班需要买4只活鸡。如果不具备购买活鸡的条件，可带放冇抗凝剂的烧杯左市场售活鸡处索取鸡血。准备好实验盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器（塑料烧杯和试管）。因为鸡血细胞破碎以后释放出的DA,容易被玻璃容器吸附，使木來从细