浅谈DNA的粗提取和鉴定

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1、浅谈DNA的粗提取和鉴定一、DNA粗提取与鉴定知识目标1.识记：获得鸡血细胞的方法。2.理解：（1）提取鸡血细胞核物质的方法；（2）提取含杂质较少的DNA的方法；（3）DNA鉴定的方法。教学目标达成1.板书：制鸡血细胞液（加抗凝剂）〜获鸡血细胞（离心或静置）一获鸡血细胞核物质（提取一溶解一析出一溶解一析出）一鉴定DNA（用二苯胺）指导学生按教材给出的具体步骤和板书的程序完成实验。指导过程中，耍特别关注浓度这一关键因素。实验开始，教师要提供已经制备好的鸡血细胞液。2.通过实验操作，获得鸡血细胞核物质。（1）应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤。本步骤直接决定捉取的核物质的

2、多少及实验结杲。教师应给予非常关注。（2）溶解细胞核内DNAo加2mol/L的NaCl溶液并用玻棒搅拌。（3）析出DNA黏稠物并过滤。关键步骤：注意①注蒸憾水要慢，防过量而使DNA重新溶解（把握浓度达0.14mol/L）。②轻轻沿同一方向搅拌，有利于DNA析出、附着、缠绕。（4）再溶解DNA黏稠物并过滤。用浓度为2mol/L的NaCl溶液。（5）提取含杂质较少的DNA。用预冷的95%的酒精。因其①可抑制核酸水解酶活性，防止降解。②降低分子运动，易析出沉淀。③低温利于增加DNA柔韧性，减少断裂。3.DNA鉴定。用二苯胺在沸水浴屮与DNA作用岀现蓝色。注意设对照实验。注意事项

3、：①学生在操作中常常发生：不能形成黏稠物、制取的DNA粗制品有红色（血红蛋白颜色）或由于加入溶液和搅拌过程不科学导致实验现象不明显等现彖。②实验过滤用两层纱布效杲较好。③使用玻棒用细玻棒效果更佳。二、评价设计:DXA的粗提取与鉴定学习效果评价1.含有DNA的NaCl(0.015mol/L)溶液中加入二苯胺试剂后，加热煮沸5min,溶液呈A.紫色B.蓝色C.砖红色D.红色2.DNA不溶解丁A.NaCl溶液B.KC1溶液C・C2II50H溶液D.MgC12溶液3.细胞屮提取DNA所用的提取液是A.NaCl溶液B.酒精C.二苯胺D.柠檬酸钠4.在实验中，有两次DNA的沉淀析出，

4、其依据的原理是①DNA在NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时溶解度最低②DM在冷却的体积分数为95%的酒精屮能沉淀析出A.两次都是①B.两次都是②C.第一次是①，第二次是②D.第一次是②，第二次是①5.向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馆水的目的是A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出D.减少杂质的溶解度，加快杂质的析出6.对三次过滤的叙述中，不正确的是A.笫一次过滤后，核物质存在于滤出的固体物屮B.第二次过滤后，使用多层纱布，DNA存在于纱布上的黏稠物中C.第三次过滤后，DNA存在于滤液中，可进一步除去非DNA

5、物质D.上述B、C均正确7.DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性，随着NaCl溶液浓度的变化而变化。(1)请在下列浓度的NaCl溶液中，选出能使DNA析出最彻底的一种和溶解度最高的一种A.0.14mol/LB.2mol/LC.0.15mol/LD.0.3mol/L(1)欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出，需降低NaCl溶液的浓度，最有效的方法是A.加蒸谓水B.加矿泉水C.加清水D.加生理盐水(2)不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以，可以推测溶于酒精的物质中可能有(4)利用DNA遇呈蓝色的特性，将该物质作为鉴定DN

6、A的试剂。其实验过程要点是向放冇时试管中加入4mL的。混合均匀后，将试管置于5min,待试管,观察试管中溶液颜色的变化。这个实验也说明DNA耐温，前次温度有利于,后次温度则有利于DNAo1.粗提取DNA的原理是,纯化粗提取DNA的原理是2.在此实验小，具有和蛋门水解酶相似作用的物质是A.蒸馆水B.NaCl溶液C.NaOH溶液D.盐酸3.关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？(1)鸡血细胞中红细胞,家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中细胞数目较多，可以捉供丰富的o(2)实验前曲老师制备血细胞液供同学们做实验材料，

7、而不用鸡全血，主要原因是(3)生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是,这是因为这些动物和人类一•样，4.该实验屮有六次用玻璃棒搅拌。第一次搅拌加蒸憾水的鸡血细胞悬液是为了;第二次搅拌加2mol/L的NaCl溶液的滤液是为了使其与DNA第三次搅拌加蒸憎水至0.14mol/LNaCl溶液是为了；第四次搅拌放入纱布上的黏稠物的2mol/L的NaCl.溶液是为了；第五次搅拌体积分数为95%的酒精为了;第六次搅拌放入丝状物的0.015niol/L的NaCl溶液是为了使参考答案1.B2.C3.A