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时间:2019-09-24
《《生化分离技术实验》教学大纲》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、《生化分离技术实验》教学大纲一、说明:《生化分离技术》是生物技术专业的必修课,是一门研究生化物质的各种分离纯化技术的专业课,是生物工程学科的重要组成部分,该课程是本专业学生必须掌握的一门课程。通过实验使学生能掌握生化分离屮重要分离技术的原理和方法。(-)教学目的和要求:1、在本实验课程中培养和提高学生运用生物分离技术的原理的能力。2、掌握生物分离技术的基本方法和技能,培养学生正确记录实验数据和现彖、正确处理实验数据和分析实验结果的能力。3、培养学生严谨认真、实事求是的科学态度和良好的实验作风。4、在教学中,教师要向学生讲明该实验课的性质、任务,并使学生明确实验课的地位和作用,
2、提高学生学习的主动性。5、学生实验前,必须预习实验内容,了解每个实验的目的、原理和方法。6、实验过程中,要求学生操作要规范、做好实验原始记录、爱惜仪器、节约药品、遵守安全制度、使学生养成良好的实验习惯,树立良好的学风。7、要求学生实验后按时完成实验报告。(―)教学重点和难点本课程教学重点为沉淀方法原理和适用性;膜分离机理的两种模型,常用的浓差极化和膜污染的特征解决方法;溶剂萃取法的分配定律的灵活运用;离子交换法机理;吸附法;色层分离原理和适用范围;常用的色层分离技术理论;结晶技术理论等。本课程教学难点为1.各种生化分离方法的原理;2.生化分离技术在生产及科研实践中的应用。(三
3、)教学方法和改革措施(1)通过本课程的课堂讲授与课外自学;(2)内容求精求新,以培养兴趣、增长知识、鼓励创新为目的,以阐明基本原理和研究设计思路为重点,结合实例简单介绍基本工艺,不断补充该学科最新进展。重点章节发放英文研究论文资料,鼓励学生自学讨论。(四)总学时12学时(五)学分1学分(六)开课学期三年级上学期二、大纲内容和学时分配(一)教学内容一、实验学时:2实验一盐析沉淀二、实验目的:(1)掌握研析的原理与方法;(2)利用盐析法分离不同蛋白质(本实验屮分离球蛋口与清蛋口)。三、实验内容:盐析法分离蛋清屮的球蛋白和清蛋白;四、实验要求:(1)掌握盐析的原理与方法;(2)学习
4、设计分离不同蛋白的实验步骤。五、实验所需仪器设备仪器类:试管,烧杯,量筒,玻棒,离心机,天平,牛角匙,电炉,铁架台等。化学试剂类:1•蛋白质溶液:5%卵淸蛋白溶液或鸡蛋清水溶液(新鲜鸡蛋淸:水二1:9);2.硫酸钱。实验二去细胞壁的枯草芽抱杆菌液体培养一、实验学时:2学时二、实验目的:(1)了解无菌操作的要求;(2)学会细菌接种、培养方法;(3)学会用氨节青霉素或溶菌酶去革兰氏阳性菌细胞壁的方法。三、实验内容:枯草芽泡杆菌液体培养,氨节青霉素或溶菌酶去细胞壁。四、实验要求:(1)了解无菌操作的要求(2)学会细菌接种方法(3)学会用氨节青霉素或溶菌酶去革兰氏阳性菌细胞壁的方法。
5、五、实验所需材料及仪器设备:实验仪器及耗材:接种针,接种环,酒精灯或煤气灯,消毒洒精棉球,银子,试管架,标签纸,培养箱(37°C)电子天平,pH计,微波炉,超净工作台实验材料:(1)菌种:枯草芽抱杆菌(Bacillussubtilis)(2)培养基试剂:葡萄糖(或蔗糖),蛋白腺,氯化钠,牛肉膏,琼脂,氨节青霉素,溶菌酶。实验三选择变性剂沉淀法去除DNA中的蛋白质杂质一、实验学时:2学时二、实验目的:1.T解酚氯仿法破碎细胞的原理。2.了解酚氯仿法去除DNA屮的杂蛋白的原理。3.学习DNA的纯化技术。三、实验内容:酚氯仿破碎细胞,酚氯仿去除杂蛋白,DNA的纯化。四、实验要求:掌
6、握酚氯仿破碎细胞的原理和技术,掌握酚氯仿异戊醇去除杂蛋白的原理与方法,掌握选择变性沉淀的原理,了解DNA纯化的基本技术。五、实验所需材料及仪器设备:1.活材料:枯草芽抱杆菌(Bacillus.subtilis)2.培养基:牛肉膏责白腺培养基(牛肉膏,蛋白腺,NaCl,琼脂)。3.试剂:苯酚,氯仿,异戊醇,乙醇4.实验用品:三角瓶,接种环,酒精灯,试管,接种针,离心机等。实验四凝胶色谱法分离甘油三酯一、实验学时:4二、实验目的:通过从粗油中分离廿油三酯,学习运用凝胶色谱法分离油脂中各个成分的方法。三、实验内容:吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以
7、使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。硅胶色谱频繁使用在脂质中的单一脂质,糖脂质以及磷脂质的分离。各种脂质被硅胶吸附,随着洗脱溶液的极性增加,各种极性不同的化合物被分离出来。四、实验要求:(1)了解从粗油中分离甘油三酯的方法;(2)学习凝胶色谱分离方法。五,实验所需基本仪器设备:1实验所需基本仪器设备:层析柱(1・5X75cm)2250mL三角容量瓶3分析天平(0.001g)4真空浓缩装置5搜集瓶实验五HPLC法测定按基化合物一、实验学时:4学时二、实验目的:通过学习测定拨基
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