《生化分离技术实验》教学大纲

《《生化分离技术实验》教学大纲》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、《生化分离技术实验》教学大纲一、说明：《生化分离技术》是生物技术专业的必修课，是一门研究生化物质的各种分离纯化技术的专业课，是生物工程学科的重要组成部分，该课程是本专业学生必须掌握的一门课程。通过实验使学生能掌握生化分离屮重要分离技术的原理和方法。（-）教学目的和要求：1、在本实验课程中培养和提高学生运用生物分离技术的原理的能力。2、掌握生物分离技术的基本方法和技能，培养学生正确记录实验数据和现彖、正确处理实验数据和分析实验结果的能力。3、培养学生严谨认真、实事求是的科学态度和良好的实验作风。4、在教学中，教师要向学生讲明该实验课的性质、任务，并使学生明确实验课的地位和作用，

2、提高学生学习的主动性。5、学生实验前，必须预习实验内容，了解每个实验的目的、原理和方法。6、实验过程中，要求学生操作要规范、做好实验原始记录、爱惜仪器、节约药品、遵守安全制度、使学生养成良好的实验习惯，树立良好的学风。7、要求学生实验后按时完成实验报告。（―）教学重点和难点本课程教学重点为沉淀方法原理和适用性；膜分离机理的两种模型，常用的浓差极化和膜污染的特征解决方法；溶剂萃取法的分配定律的灵活运用；离子交换法机理；吸附法；色层分离原理和适用范围；常用的色层分离技术理论；结晶技术理论等。本课程教学难点为1.各种生化分离方法的原理；2.生化分离技术在生产及科研实践中的应用。（三

3、）教学方法和改革措施（1）通过本课程的课堂讲授与课外自学；（2）内容求精求新，以培养兴趣、增长知识、鼓励创新为目的，以阐明基本原理和研究设计思路为重点，结合实例简单介绍基本工艺，不断补充该学科最新进展。重点章节发放英文研究论文资料，鼓励学生自学讨论。（四）总学时12学时（五）学分1学分（六）开课学期三年级上学期二、大纲内容和学时分配（一）教学内容一、实验学时：2实验一盐析沉淀二、实验目的：（1）掌握研析的原理与方法；（2）利用盐析法分离不同蛋白质（本实验屮分离球蛋口与清蛋口）。三、实验内容：盐析法分离蛋清屮的球蛋白和清蛋白；四、实验要求：（1）掌握盐析的原理与方法；（2）学习

4、设计分离不同蛋白的实验步骤。五、实验所需仪器设备仪器类：试管，烧杯，量筒，玻棒，离心机，天平，牛角匙，电炉，铁架台等。化学试剂类：1•蛋白质溶液：5%卵淸蛋白溶液或鸡蛋清水溶液（新鲜鸡蛋淸：水二1：9）；2.硫酸钱。实验二去细胞壁的枯草芽抱杆菌液体培养一、实验学时：2学时二、实验目的：（1）了解无菌操作的要求；（2）学会细菌接种、培养方法；（3）学会用氨节青霉素或溶菌酶去革兰氏阳性菌细胞壁的方法。三、实验内容：枯草芽泡杆菌液体培养，氨节青霉素或溶菌酶去细胞壁。四、实验要求：（1）了解无菌操作的要求（2）学会细菌接种方法（3）学会用氨节青霉素或溶菌酶去革兰氏阳性菌细胞壁的方法。

5、五、实验所需材料及仪器设备：实验仪器及耗材：接种针，接种环，酒精灯或煤气灯，消毒洒精棉球，银子，试管架，标签纸，培养箱（37°C）电子天平，pH计，微波炉，超净工作台实验材料:（1）菌种：枯草芽抱杆菌（Bacillussubtilis）（2）培养基试剂：葡萄糖（或蔗糖），蛋白腺，氯化钠，牛肉膏，琼脂，氨节青霉素，溶菌酶。实验三选择变性剂沉淀法去除DNA中的蛋白质杂质一、实验学时：2学时二、实验目的:1.T解酚氯仿法破碎细胞的原理。2.了解酚氯仿法去除DNA屮的杂蛋白的原理。3.学习DNA的纯化技术。三、实验内容：酚氯仿破碎细胞，酚氯仿去除杂蛋白，DNA的纯化。四、实验要求：掌

6、握酚氯仿破碎细胞的原理和技术，掌握酚氯仿异戊醇去除杂蛋白的原理与方法，掌握选择变性沉淀的原理，了解DNA纯化的基本技术。五、实验所需材料及仪器设备：1.活材料：枯草芽抱杆菌(Bacillus.subtilis)2.培养基：牛肉膏责白腺培养基(牛肉膏，蛋白腺，NaCl,琼脂)。3.试剂：苯酚，氯仿，异戊醇，乙醇4.实验用品：三角瓶，接种环，酒精灯，试管，接种针，离心机等。实验四凝胶色谱法分离甘油三酯一、实验学时：4二、实验目的：通过从粗油中分离廿油三酯，学习运用凝胶色谱法分离油脂中各个成分的方法。三、实验内容：吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱,以

7、使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。硅胶色谱频繁使用在脂质中的单一脂质，糖脂质以及磷脂质的分离。各种脂质被硅胶吸附，随着洗脱溶液的极性增加，各种极性不同的化合物被分离出来。四、实验要求：(1)了解从粗油中分离甘油三酯的方法；(2)学习凝胶色谱分离方法。五，实验所需基本仪器设备：1实验所需基本仪器设备：层析柱(1・5X75cm)2250mL三角容量瓶3分析天平(0.001g)4真空浓缩装置5搜集瓶实验五HPLC法测定按基化合物一、实验学时：4学时二、实验目的：通过学习测定拨基