生化分离实验程教学大纲

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1、生化分离实验程教学大纲开课院系：食晶科学与工程学院1学分1学分辛秀兰总学分：学分：编者：课程编号：081703102325课程英文名称：BiochemicalSeparationExperiment课程总学时：34学时出版时间及版次：2005年含实验或实践学时：34学时推荐使用教材：生物分离与纯化技术出版社：科学出版社课程教学目标与基本要求：牛化分离工程课程是牛物工程专业继牛物化学、微牛物学、化工原理之后，与牛物工艺学、牛化工程与设备等课程为平行课的一门重要必修课。生化分离实验是牛化分离工程课程的相应实验课程。该实验课程实践性、技术性很强，综合运用牛物工程下游技术课程的理论基础和主要技术从牛

2、物材料中分离和纯化牛物物质。根据牛物工程下游技术的一般工艺流程，结合生物工程下游技术的原理,木实验课程主要包括发酵液的培养、细胞破碎、固液分离、沉淀、透析、层析等主要的下游技术。要求学牛通过木门课程的学习，应达到基木目标：(1)通过木实验课程培养和提高学牛运用牛物工程下游技术的原理的能力，使学生了解生物体系的基木特点及对分离过程的特殊要求，理论联系实际。(2)系统地掌握生物分离技术的基木方法和操作技能，培养学牛正确记录实验数据和现象、正确处理实验数据和分析实验结果的能力。(3)培养学牛严谨认真、实事求是的科学态度和良好的实验作风。(4)使学生在实际工作中能够正确地选择和运用各种生物分离技术,

3、培养学牛综合分析和解决问题的能力；(5)培养学生从事与生物技术相关科研与牛产的能力。考试形式：1、随着实验设备的补充，由教师根据实际需要对实验教学内容进行调整。2、每次实验要求学牛写预习实验报告，教师在课前检查预习实验报告，并根据学牛的预习情况提出针对性问题。实验过程的数据记录和结果分析应记录在预习实验报告上在实验结束后作为完整的实验报告上交。3、成绩评定：主要考查内容包括出勤、预习、实验态度、操作技能、卫牛、实验报告等，其中操作技能占主要部分。授课内容(细化到章、节、目)教学目标授课模式学时分配实验一酵母细胞的破碎及破碎率的测左1.发酵液的培养2.菌体收集与洗涤3.菌体破碎4.破碎率测定1

4、.常握发酵液的培养及固液分离的方法的原理与操作2.掌握渗透压法、超声波法等细胞破碎方法的原理与操作教师指导学生实际操作4实验二双水相萃取分离酿酒酵母屮延胡索酸酶1.发酵液预处理2.双水相溶液配制3.双水相萃取4•计算分离效率、分离度1.进一步熟悉细胞破碎操作方法2.掌握双水相溶液配制与双水相萃取的操作3.掌握分离效率、分离度的计算方法教师指导学生实际操作6实验三鸡卵黄中卵磷脂的分离与纯化1.卵黄预处理2.乙醇溶剂提取1・掌握用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的原理和方法2.掌握索氏提取法操作过程教师指导学化实际操作6实验四离子交换法从发酵液屮提取L-乳酸1.装柱2.上样3.洗脱4.检测5.收集6.记录

5、7.回收1•掌握包括梯度混合器、蠕动泵、层析柱、紫外检测器、部分收集器、记录仪在内的柱层析系统的仪器使用2.常握装柱、样品处理、上样、梯度洗脱的操作3.掌握离子交换柱层析技术方法4.对发酵液中的L-乳酸进行离了交换纯化教师指导学生实际操作5实验五牛奶屮酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备1.等电沉淀2.盐析沉淀3.离心分离4.透析除盐1•掌握等电沉淀、盐析沉淀等蛋白质沉淀方法2.掌握固液分离及透析除盐等蛋白质沉淀后操作步骤教师指导学生实际操作L5实验五从发酵液中提取谷氨酸并进行纯化1.菌体去除2.发酵液pH调解3.育晶与分离1.掌握谷氨酸的分离提纯的原理与工艺2.掌握结晶法精制技术3.进一步熟悉离子交

6、换层析教师指导学化实际操作44.离交精提实验六层析法制备细胞色素C粗品1.凝胶溶胀2.装柱3.平衡4.上样5.洗脱6.检测除盐效果1•进一步熟练学握柱层析系统的仪器使用2.进一步熟练掌握装柱、样品处理、上样、梯度洗脱的操作3.掌握凝胶过滤柱层析技术方法4.对细胞色素C进行凝胶过滤纯化和浓缩教师指导学生实际操作6学习参考书（注明编者，出版社，出版时间及版次）：张龙翔等编著，牛化实验方法和技术，高等教育出版社，2001年赵永芳主编，牛物化学技术原理及应用，科学出版社，2003年杨建雄编著，牛物化学与分子牛物学实验技术教程，科学出版社，2003年彭秀玲等编著，基因工程实验技术，湖南科学技术出版社，

7、1997年第二版何丽一编著，平面色谱方法及应用，化学工业出版社，2000年傅若农等编著，近代色谱分析，国防工业出版社，1998年