骨髓间充质干细胞对大鼠重症急性胰腺炎损伤修复的作用

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1、【摘要】目的探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对重症急性胰腺炎（SAP）胰腺损伤的修复作用。方法将60只大鼠随机（随机数字法）分为健康对照组、SAP模型组、MSC移植组、MSC加粒细胞集落刺激因子（G-CSF）联合组。免疫荧光检测MSC的转化率，生化法检测血清淀粉酶含量，ELISA法检测血清白介素IL-6质量浓度。结果骨髓间充质干细胞转化率上升，血清淀粉酶含量和白介素IL-6质量浓度下降，增加粒细胞集落刺激因子（G-CSF）联合治疗，MSC细胞量较少时，产生协同作用增强MSC的修复作用，MSC细胞量较大时，产生拮抗作用加重胰腺组织的损伤。差异有统计学意义（P中国论文网　　【关键词】骨髓

2、间充质干细胞；重症急性胰腺炎；保护作用；粒细胞集落刺激因子　　ExploretheprotectiveeffectsofthebonemarrowmesenchymalstemcellsonsevereacutepancreatitisinratsSHANYU-qiang*，LUOLiang，JIAZhong，CAIYang，JINHui-cheng，FENGGuang-hua.*DepartmentofGenernalSurgery，HangzhouFirstPeople’sHospital，Hangzhou310006，China　　Correspondanceauthor：J

3、INHui-cheng，Email：shang110117@163.com　　【Abstract】ObjectiveToinvestigateeffectsofbonemarrowmesenchymalstemcells（MSC）onsevereacutepancreatitis（SAP）inrats.MethodsAtotalof60ratswererandomlydividedintonormalgroup（n=10），themodelofSAPgroup（n=10），thetransplantationoftheMSCgroup（n=20），thecombinationoft

4、heMSCandthegranulocytecolony-stimulatingfactor（G-CSF）group（n=20）.TheconversionrateofMSCwasdetectedbyusingimmunofluorescencemethods，andthelevelofamylaseinserumwasassayedbyusingbiochemicalmethods.Simultaneously，thelevelofinterleukin-6（IL-6）inserumwasdeterminedbyusingenzymelinkedimmunosorbentassa

5、y（ELISA）.ResultsTheconversionratesoftheMSCincreased，andconsequently，thelevelsofamylasesandinterleukin-6inserumwerereduced（P[1]。骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSC）是存在于多种器官中的多能干细胞，具有多向分化潜能，且易进行体外分离和纯化培养。因此，探索其在胰腺损伤中发挥的修复作用，具有重要的临床应用价值[2-3]。粒细胞集落刺激因子（granulocytecolony-stimulatingfactor，G-CSF）是一种多肽

6、链的细胞生长因子，具有免疫调节、血管保护及促进血管发生的作用。近年来，使用MSC缓解脊髓损伤、MSC治疗脑损伤、MSC治愈肺损伤等具有一定作用[3-4]。因此，本实验首次以SAP大鼠模型为研究对象，尾静脉注射EDU标记的MSC与G-CSF，检测SAP大鼠胰腺组织的免疫荧光及转化率、血清淀粉酶的含量和白介素IL-6的质量浓度。探讨MSC对SAP胰腺损伤后修复作用的机制[5]，为临床开展MSC治疗重症急性胰腺炎提供理论依据。　　1材料与方法　　1.1实验动物与主要试剂　　雌性成年大鼠，鼠龄8周，60只，体质量200～250g，由南方医科大学实验动物中心提供，动物合格证：0096502；

7、雌性幼鼠，鼠龄4周，5只，体质量40～50g，由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证：0097319；L-精氨酸购于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；重组人粒细胞刺激因子注射液购于齐鲁制药有限公司；淀粉酶检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；IL-6ELISA试剂盒购于NeoBioscience公司。　　1.2方法　　1.2.1MSC的分离培养及EDU标记造模前1周，将雌性幼鼠脱臼处死，用75%酒精浸泡。无菌条件下分离股骨和肱骨，用DMEM培养基冲出骨髓，制备成单细