骨髓间充质干细胞对pof大鼠卵巢修复作用研究

《骨髓间充质干细胞对pof大鼠卵巢修复作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＇ｒ４？ｊｉ＼１分类号Ｒ７：０１６０１１．５９单位代码学号：２０１２２００８０？ｆ番寒後硕±学位论文题目：骨髓间充质干细胞对ＰＯＦ大鼠卵巢修复作用研究民ｅｓ化ｒａｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｓｏｆ目ＭＳＣｓｏｎＯｖａｒｉｅｓｉｎＰＯＦＲａｔｓ研究生；刘加宾导师：艾浩学科专业：知产科学一论文课题起止时间：２０１３年４月２０１５年３月论文完成时间；２０１５年３月辽宁医学院研究生学位论义独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我

2、本人在导师指导下进行的研究工Ｌ作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加乂标注和致谢的地方外，，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果化不包含一为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的罔志对本巧究所做的任何贡献均臣在论文中作了明确的说明并表示谢意。一申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担巧相关责任。论文作者签連：目期：ｗＬＬ心．狂宁医学院硏究生学位论文版校使用授权书本人完全了解迂宁医学院有关保护知识产权的规定，邵：研究生在攻读学位期间论文王作的知

3、巧产权单位属巧宁医学院。本人保证毕业离校后，发表论文或使巧论文工作成果时署名单化为巧宁蔭学晓，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为巧宁医学晓。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可（公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），Ｌ义采用影印、缩印或其他手段保存论论文。文作者签卡少指导教师签省：化目录一、摘要中文论著摘要…………………………………………………………………1英文论著摘要…………………………………………………………………4二、英文缩

4、略语表…………………………………………………………………7三、论文前言……………………………………………………………………………8实验材料与方法………………………………………………………………9实验结果………………………………………………………………………16讨论……………………………………………………………………………27结论……………………………………………………………………………29四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………30五、参考文献………………………………………………………………………

5、31六、附录综述……………………………………………………………………………34在学期间科研成绩……………………………………………………………40致谢……………………………………………………………………………41个人简介………………………………………………………………………42•中文论著摘要•骨髓间充质干细胞对POF大鼠卵巢修复作用研究目的探讨骨髓间充质干细胞（Bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs）在POF（Prematureovarianfailure,POF）大鼠卵巢内

6、的归巢及对卵巢功能调节作用，为BMSCs移植治疗卵巢早衰提供实验基础。方法1、大鼠BMSCs的体外分离、培养、鉴定及标记：通过差异贴壁法从SD大鼠骨髓中分离BMSCs，用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养。采用流式细胞仪检测BMSCs表面因子CD29、CD45、CD34及CD90的表达鉴定BMSCs。流式细胞仪检测BMSCs细胞周期明确细胞的生长特性。用携带增强型绿色荧光蛋白基因的腺病毒（Ad-EGFP）转染BMSCs，分别用转染复数（Multiplicityofinfection,MOI）为50、100、150

7、、200、400的Ad-EGFP转染BMSCs，在24小时、48小时及72小时用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达及细胞形态变化，寻找最佳MOI。2、体外BMSCs对顺铂损伤颗粒细胞的影响：分离培养大鼠卵巢颗粒细胞（granulosacells,GCs），通过免疫细胞化学检测促卵泡激素受体（folliclestimulatinghormonereceptor,FSHR）在颗粒细胞中表达来鉴定GCs。GCs加入不同浓度的顺铂（分别为1mg/L、2.5mg/L、5mg/L、7.5mg/L、10mg/L），通过CCK-8检测顺铂

8、对GCs生长影响，选用最佳浓度。在最佳浓度的顺铂作用下将BMSCs和GCs以1:1比例共培养，48小时后收集GCs，Annexin-V/PI法检测GCs凋亡率，并用结晶紫染色，观察GCs形态变化。应用Transwell法检测BMSCs向顺铂损伤的GCs迁移能力。3、BMSCs在顺铂所致POF大鼠卵巢内归