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1、HPV-DNA检测在宫颈癌筛查中的现状与展望摘要:子宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,严重危害着广大妇女的健康与生命。早期筛查对子宫颈癌与宫颈上皮内瘤变(CIN)的防治有重要意义。大量研究表明,高危型人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染是引发子宫颈癌的主要生物因素,所以HPV-DNA检测对宫颈癌的防治有着重要的作用。现就该检查在宫颈癌筛查中的现状和进展予以综述,为以后的研究提供参考。关键词:人乳头瘤病毒;宫颈癌;筛查宫颈癌作为女性第二好发恶性肿瘤,它的防治关键是进行宫颈筛查及上皮内瘤变(cervicali
2、ntraepithelialneoplasis,CIN)。而人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)是导致宫颈病变引发宫颈癌的重要环节,尤其是高危型HPV的持续感染,因此越来越多的临床医师使用HPV-DNA检测,它也成为宫颈疾病筛查和诊断中的重要辅助手段之一。现就HPV-DNA的检测对宫颈癌的筛查、诊断的意义进行综述,为以后的研究提供参考。1HPV-DNA的检测方法HPV是一种嗜上皮性病毒,也是一种脱氧核糖核酸(DNA)病毒,检测HPV的方法有免疫组织化学、原位杂交、斑点杂交
3、、核酸印迹和聚合酶链反应等。1996年由美国Appliedbiosystems公司推出了在传统聚合酶链反应技术上发展起来的实时荧光定量聚合酶链反应检测,它不仅具有较高的特异性和敏感性,还实现了检测、定量、分型的同步进行,检测简便快速。但其检测费用和实验条件要求较高,目前大都处于实验室阶段,不适合大规模HPV筛查和流行病学研究[1]。最近Digene公司推出的杂交捕获二代(hybirdcaptureⅡ,HC-Ⅱ)是唯一通过美国食品药品管理局批准的可在临床使用的HPV-DNA检测技术[2],虽然可检出
4、13种高危型、5种低危型HPV及病毒载量,却不能确定其具体型别。Digene公司随后又在杂交捕获法技术的基础上结合基因芯片推出了HCExpressArray技术。该技术利用芯片上固定的病毒不同亚型的特异性DNA探针,对病毒型别进行判断,因其具有快速分型和定量的特点在将来必定会有非常广阔的应用前景。2008年问世的HPV快速筛查技术(careHPV)在识别宫颈病变的敏感性和特异性方面稍差于HC-Ⅱ,且不能定量,但它能够在2.5h内筛查出结果,其假阴性率为10%,假阳性率为16%,费用只是HC-Ⅱ的1
5、/10。2011年韩颖鑫等[3]发明了一种用质谱技术进行HPV分型和定量的新方法。2HPV-DNA检测的重要性2.1HPV-DNA检测与宫颈病变的关系子宫颈癌的发病与HPV感染有关的报道始于20世纪70年代,随后大量研究已基本明确HPV持续感染是宫颈癌发病的首要条件,HPV与宫颈癌的归因危险百分比超过90%[4]。HPV-DNA检测诊断宫颈癌及CIN敏感性高,阴性预测值达到100%,已广泛用于宫颈癌的筛查[5]。一项2526例的山西、辽宁和深圳的联合调查CIN≥Ⅱ的HPV检测灵敏度达90.54%,
6、特异度达98.36%[6]。隋霜等[7]报道的CIN灵敏度达80.86%,宫颈癌特异度为93.82%。魏颖颖等[8]报道的CIN灵敏度达98.55%,宫颈癌为100%,与国外文献报道的99.8%基本一致[9]。由此可见,对子宫颈癌发病的生物学危险因素主要集中在HPV感染上,它是导致CIN和宫颈癌的主要因素。2.2HPV-DNA检测分析地区差异性和共性目前已确定的HPV基因型有120多种,其中与生殖道感染有关的有40多种,已认定的高危型有15种(16、18、31、33、35、39、45、51、52、
7、53、56、58、59、66、68),低危型有6种(6、11、42、43、44、CP8304)。世界范围的流行病学资料表明,HPV感染基因型分布存在地域差异[10]。在美国HPV感染率的前5位是HPV56、53、16、58及52;非洲是HPV52、35、58、51及16;印度是HPV16、18、33、58及35;新疆省乌鲁木齐是HPV16、31、58、52及18[11];江苏省常州是HPV16、58、39、6及33[6];广州地区是HPV52、16、51、58及68;粤东地区是HPV16、18、5
8、8、33及73。上述资料所检出的亚型基本是HPV的高危型,说明导致宫颈癌发生、发展的必要条件是高危型HPV的持续性感染。人宫颈癌标本中HPV的检出率高达99%,HPV16、18阳性率分别为60%和14%,其中HPV16是地区差异性最小,致癌性最强,与CIN和宫颈癌的关系最为密切的基因[12]。2.3HPV-DNA检测高危人群由于人们观念的改变,过早、过频性生活及性生活混乱使宫颈炎越来越多,很多合并HPV感染,进而引起CIN,若不除去病因,则有1%进一步发展为宫颈癌。而最近十年来,研
