异叶败酱抗肿瘤活性物质基础研究

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1、中图分类号论文编号学科分类号密级？ＶＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ硕士学位论文异叶败酱抗肿瘤活性物质基础研究ｏｎ－ｍｏｒＳｔｕｄＡｎｔｉｔｕａｃｔｉｖｅＳｕｂｓｔａｎｃｅｏｆＰａｔｒｉｎｉａｈｅｔｅｒｏｈｌｌａＢｕｎｙｐｙｇ研究生姓名：刘俐导师姓名、职称：刘屏研究员学科：、专业名称中药学专业研究方向：中药化学成分研究及活性成分筛选申请学位类型：科学学位二Ｏ—七年五月二十二日山西中医学院学位论文原创性声明，，本人郑重声明：所呈交的学位论文是个人在导师的指导下独立进行研究工作

2、所取得的成果，本论文不含任何其他个人或。除文中己经特别加以注明引用的内容外集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明并致谢。。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担论文作者签名：年ｉ：月从日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山西中医学院有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权山西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守

3、此规定）论文作者签名：令论文导师签名：１年］：月公日）中文摘要目的：异叶败酱（PatiniaheterophyllaBunge）为败酱科败酱属多年生草本植物，异叶败酱与糙叶败酱的根茎或全草混用，药材名墓头回，表示有起死回生的作用。墓头回存在多种治疗肿瘤的中药复方中，并且对急慢性白血病有很好的治疗作用。异叶败酱作为墓头回的主流品种,其化学成分报道较少，研究不够深入。本研究采用硅胶色谱柱、中压反相色谱柱及羟丙基葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)柱等色谱分离技术，对异叶败酱的化学成分进行提取分离，并根据质谱、1H-NMR、13C-NMR的波谱数据，结合理化性质鉴定化合物的结

4、构。通过CCK-8试剂盒测定粗提物以及单体化合物对不同白血病细胞株增殖的抑制作用，为明确异叶败酱的抗肿瘤机制奠定基础。方法：乙醇加热回流提取异叶败酱全草，得到异叶败酱浸膏。将浸膏用水悬浮，依次加入等体积石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇四种不同极性的有机溶剂进行萃取，得到极性不同的四部分；采用硅胶色谱柱、中压反相色谱柱及羟丙基葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)柱等色谱分离技术对氯仿部分和乙酸乙酯部分进行分离，经质谱（ESI-MS）和核磁共振波谱（NMR）分析鉴定确定化合物结构；采用CCK-8法测定异叶败酱不同极性部位、单体化合物和阳性对照药顺铂对人人早幼粒白血病细胞HL-60、人慢性粒细

5、胞白血病细胞K562、人T细胞白血病细胞Jurkat细胞生长的抑制作用，通过计算IC50进行初步的抗肿瘤活性评价。结果：从异叶败酱氯仿和乙酸乙酯萃取部分分离鉴定出9个化合物，分别为甘松香醇A（Ⅰ）、1'，3'-二氧[6,7]环戊二烯并[c]吡喃-3（1H）-酮，六氢-2'，2'，4-三甲基-，（4R，4aS，6R，7R，7aS）（Ⅱ）、（4S，4aS，6S，7S，7aS）-6-羟基-7-（羟甲基）-4-甲基六氢环戊二烯并[c]吡喃-3（1H）-酮（Ⅲ）、3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→4)β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（Ⅳ）、3-

6、O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→4)β-D-吡喃葡萄糖齐墩果酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（Ⅴ）、鼠李柠檬素3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷（Ⅵ）、胡萝卜苷（Ⅶ）、熊果酸（Ⅷ）、β-谷甾醇（Ⅸ）。其中化合物Ⅱ、Ⅲ为新化合物、化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ为首次从该属植物中发现。化合物Ⅱ、Ⅲ对HL-60、K562、Jurkat三株细胞均表现出了明显的毒性抑制作用，其余化合物对三株白血病细胞具有不同的抑制作用。化合物Ⅰ、Ⅳ对Jurkat细胞基本不表现毒性抑制作用，化合物Ⅴ对K562和Jurkat细胞几乎没有抑制作用，化合物Ⅵ对三株细胞的生长抑

7、制无效。同时，化合物对细胞的毒性抑制作用均呈现出了剂量相I关性，随着药物浓度的增大，细胞受到的毒性作用越强。比较化合物Ⅱ、Ⅲ的作用结果，推测环戊二烯并[c]吡喃和4位甲基结构是环烯醚萜类成分发挥毒性抑制作用的有效基团，4-CH3顺式或者反式对于药效作用的影响没有相关关系。结论：目前从异叶败酱中分离得到了9个化合物，其中有3个环烯醚萜类成分，3个三萜皂苷及苷元，1个黄酮以及β-谷甾醇和胡萝卜苷。其中环烯醚萜化合物Ⅱ、Ⅲ对不