竹根七抗肿瘤药效物质基础研究

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2、中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签论文导师签日期：硼件年r月z彳日日期：加心年r月2罗日摘要㈣㈣IIIIl洲㈣吣IlIlIIIIII㈣㈣Y2617311竹根七为百合科开口箭属植物开口箭(聊括抛幽f门P瑚括Baker．)的根茎，别名竹根参、竹节七、牛尾七、包谷七等，用药来源为开口箭的干燥根茎。多年生草本，主要生长在海拔1000m～2000m的林下阴湿处、溪边或路旁，主要分布于陕西、湖北、江西、福建、浙江等地

3、，具有清热解毒、祛风除湿、散瘀止痛等功效。通过前期文献查阅，我们发现竹根七中的主要成分为甾体皂苷，为了便于今后的研究，我们以乙醇浓度，提取时间，提取次数和溶媒倍量为影响因素，采用Box—Behlll(en实验设计，对竹根七总皂苷提取工艺进行了优化，得到竹根七皂苷类成分最佳提取工艺为11倍量65％的乙醇提取3次，每次65min。基于前期的研究成果，我们采用荧光染色、流式细胞术以及蛋白印记(westemblot)等技术研究了竹根七总皂苷对HepG2细胞凋亡和周期变化的影响，并对其作用机制进行了初步研究。结果表明，其机制可能是通过药物刺激引起细胞内P53蛋白表达水平升高，从而

4、影响Bax和Bcl—2表达，诱导线粒体凋亡因子的释放和caSpaSe的级联激活，将HepG2细胞阻滞于s期，并最终导致凋亡的发生。研究结果表明，皂苷类成分是竹根七抗肿瘤的物质基础，竹根七总皂苷在将来有希望作为一种中药有效部位提取物应用于肿瘤的治疗中。本论文对竹根七进行了系统的化学研究，利用现代分离色谱手段，从竹根七65％乙醇提取物中分离得到10个化合物，通过理化常数测定、薄层色谱检测和各种波谱学特征(1H．NMR、13C-NMR)分析，定了1O个化合物。分别为：25限)一Spirost．5．en一1∥，3倪-diol(3一印imscogenin)(1)、兰茂苷元甲(Ra

5、nmogellinA)(2)、TupichigeIlinB(3)、tupicmIlinA(5)、△25(27)-PentrogeIliIl(6)、spifost25(27)一en一1∥，印，筇，邻，观筇，7伉-h印tol(7)、1∥，筇，筇，4屈筇，7仅-hexallydroxy-spirost一25(27)-ene-6一one(8)、25(R)-1∥一hy(1roxy—spirost一5一en．3口一yl0一∥一D—glucopyranoside(9)、筇一缸ost一△25(27)一en一1屈Z厉筇，4屈5屈7仅，22己26一octaol一6-one一26一D-∥一D

6、—glucopyralloside(10)、tllpistemideB(11)。其中化合物9为首次从该种植物中分离得到。上述研究成果完善了竹根七的化学成分，并为进一步活性研究和质量标准研究提供了物质基础。并采用MTT法对化合物1、2、3、4、5、7、8、11进行了体外人源肝癌HepG2细胞株、人源肺癌A549细胞株及人源宫颈癌Hela细胞株的体外抗肿瘤活性研究；采用DPPH法对化合物1、2、3、4、5、7、8、11进行了体外抗氧化活性研究。结果表明，化合物5对H印G2、Hela及A549细胞的增值均有很强的抑制作用，而化合物11则具有很好的清除DPPH自由基的作用。为进

7、一步的药理学研究提供了方向。关键词：竹根七，化学成分，抗肿瘤，抗氧化，总皂苷StudyontheantitumorEffectiveSubstancefromrhizomesofTupiStraChinenSisAbstractZhugenqi，alsocalledzhugenshen，Z姗ieqi，NiuweiqiaJldBaoguqi，istherhjzomeofT却istrachinensisBaker．w11ichbelongstoT'uspit迅Liliaceae．Zhugenqi，aperenIlialherb，oRengro