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时间:2019-09-17
《葛花黄酮部位质量控制及解酒保肝的药效学和作用机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中图分类号论文编号学科分类号密级?ShanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文葛花黄酮部位质量控制及解酒保肝的药效学和作用机制研究FlavonoidsinPuerariaelobataflosualitcontrolandrotectliverqyptheraofharmacodnamicsandmechanismresearchpypy研究生姓名:王瑶导师姓名:、职称裴香萍副教授学科:、专业名称中药学研究方向:中药鉴定与资源研究申请学位类型:科学学位二〇—
2、*b年五月三H—曰山西中医学院学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名:z〇/7年X月糾曰关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山西中医学院有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权山西中医学院可
3、以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名?:5名藏论文导师签:4年丨占月日"葛花黄酮部位质量控制及解酒保肝的药效学和作用机制研究中文摘要目的:葛花为豆科植物野葛(Puerarialobata(Willd.)Ohwi)或甘葛藤(P.thomsoiiBeeth.)的未开放的花蕾,异名葛条花,是我国常用的解酒中药。近年来,研究报道葛花解酒保肝的主要有效成分为异黄酮类物质,与本实验前期研究相吻合;实验对葛花黄酮部位进行了质量控制、药效学以及作用机制的研究,为
4、葛花质量标准制定、临床应用及资源开发利用提供理论依据。方法:葛花药材经提取分离纯化得到葛花黄酮部位,分别采用薄层色谱法(TLC)和紫外-可见分光光度法(UV)对葛花黄酮部位进行主要成分鉴别和总黄酮含量测定;运用高效液相色谱(HPLC)法测定葛花黄酮部位中鸢尾苷、鸢尾黄素-7-O-木糖基葡萄糖苷、鸢尾苷元的含量,并建立葛花黄酮部位的色谱指纹图谱。实验选择ICR小鼠建立急性酒精中毒模型,以葛花黄酮部位高、中、低剂量进行预防性干预,通过观察葛花黄酮部位对醉酒小鼠翻正反射、学习记忆能力和运动协调性的影响和测定小鼠血中乙醇浓度、肝中乙醇脱氢酶(ADH)活性,分析葛花黄酮部位对急性酒精中毒的保
5、护作用;选择Wistar大鼠建立急慢性酒精性肝损伤模型,以葛花黄酮部位高、中、低剂量进行预防性干预,检测急慢性酒精性肝损伤大鼠的血清与肝脏中各项生化指标和肝脏病理结构的影响,分析葛花黄酮部位对急慢性酒精性肝损伤大鼠的肝脏保护作用;运用酶联免疫ELISA法和荧光定量PCR法检测慢性酒精性肝损伤大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)的含量和肝脏中核因子相关因子-2(NRF-2)、核转录因子-κB(NF-κB)、TGF-β1、CD68的mRNA表达,对慢性酒精性肝损伤大鼠的肝脏保护作用机制进行初
6、步研究分析。结果:葛花黄酮部位经提取分离纯化后,用TLC进行定性鉴别,专属性强,斑点清晰明显,分离度较好;建立UV法测定葛花黄酮部位中总黄酮含量,以鸢尾苷为对照的回归方程Y=0.0742X+0.0123,相关系数r=0.9995。方法学验证结果:精密度、重复性、稳定性均符合规定;加样回收率为97.24~102.32%,RSD为1.80%。葛花黄酮部位的总黄酮含量为93.24%。建立HPLC法同时测定葛花黄酮部位中3种成分含量的方法,鸢尾黄素-7-O-木糖基葡萄糖苷的回归方程y=2840528.18x–29185.93,相关系数r=0.9999;鸢尾苷的回归方程y=4444648.3
7、4x–139596.80,相关系数r=0.9999;鸢尾苷元的回归方程y=7328041.12x–61890.82,相关系数r=0.9998。方法学验证结果:精密度、重复性、稳I山西中医学院2017届硕士学位论文定性均符合规定;鸢尾黄素-7-O-木糖基葡萄糖苷加样回收率为98.88~103.44%,RSD为1.80%;鸢尾苷加样回收率为97.26~101.19%,RSD为1.56%;鸢尾苷元加样回收率为98.80~102.11%,RSD为1.40%。10批葛花黄酮部位
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