根瘤菌培养基的优化和剂型的比较研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com·14·微生物学通报2004年31(2)根瘤菌培养基的优化和剂型的比较研究吴红慧周俊初一(华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070)摘要：以费氏中华根瘤菌(Sinorhizobiumfredii)HN01和大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobiumjaponi．c帆)USDA110作为供试菌，进行YMA、TY、SM、PA和BSE等5种培养基的比较试验。结果表明，两种菌都在BSE中生长速度最快。对USDA110进行培养基的优化试验，筛选出一种能将生长速度

2、提高2倍左右的优化培养基。制作了供试菌的固体、液体与冻干菌剂，结果表明在3种供试固体剂型载体中，草炭要优于蛭石，蛭石又优于珍珠岩。供试菌在两种液体剂型中的存活率和活菌数均较高，氮气或真空剂型对存活率的影响没有明显的差别。两种冻干菌剂的结果表明，供试菌在冻干过程中的死亡率较高，液氮冻干优于常规冻干。冻干菌剂在储存条件下的存活率为：．2ooC>4~C>室温。关键词：大豆根瘤菌，培养基优化，剂型中图分类号：Q93文献标识码：A文章编号：0253．2654(2004)02．0014-06Ⅳ匝DIUM0PI1ⅡZA，I1oN

3、ANDDoCI】I。ANTTYPEC0MRISoNOFREⅡZ0B砌MWUHong-HuiZHOUJun-Chun(Key／z,horatoryofAgg／o~／／'eMt~zrob／o／ogy，HuazhongAgr／ctdtureUn／vers／ty，Wuhan430070)Ad：BSEInediawasscreenedfromfiveIn4~aincludingYMA，IY，SM，PAandBSEasthebestforthegrowthofrepresentativestrainSinorhizobiumf

4、rediiHNO1andBradyrhizobium面P(1凡mUSDA110．BasedonYMA，oneoptimizedin~unlwasobtainedfromorth~tests．Accordingtosurvivalpercentage，concentratedliquidtypewasprovedtobethehighestamongsolid，hdandfreeze-driedmoculanttypestested．PeatwasbeterthanvermiculiteandthelatterWaS

5、beterthanp~liteamongthreesolidmoculantcarrieIstested．Freeze-drymethodwasnotsuitablefortheproductionofrhizobiuminoculantsincethehighdeathratioduringdryprocess．Thesurvivalpercentageoffreezeatuidnitrogenwaghigherthanat一20~Candtheorderforitsstoragewas一20~C>4~C>loo

6、mtemperature．Keywords：SoybeanRhizobia，Mediumoptimization，Inoculant接种根瘤菌剂已成为世界各国豆科作物增产的一项技术措施，在许多国家都有大规模的商品菌剂生产和出售，应用面积也不断扩大，为了适应中国大豆根瘤菌剂生产的需求，本研究通过5种培养基的比较和优化试验，得到了活菌数高，生产成本低，适合大量工业发酵的培养基。在古代，农民常用客土法将多年种植豆科作物的老区土壤移到新区，以提高作物的产量⋯，自Beijerinck(1888)首次从豆科植物根瘤中分离出根瘤

7、菌后，用纯培养的根瘤菌剂接种豆科植物已在全世界大多数国家普及，并成为一项重要的农业增产技术措欧盟国际合作计划课题(No．ICA4-CT-2001—10056)国家863计划课题(No．2001AA214021)一联系人Tel：027—87281685收稿日期：2003-06—11。修回日期：2003-08—30维普资讯http://www.cqvip.com2004年31(2)微生物学通报·15·施。根瘤菌剂主要有琼脂、固体、颗粒、液体和冻干等5种主要剂型。琼脂剂型是最早应用的菌剂，在上世纪20年代，美国已用草炭菌

8、剂取代了它。固体剂型主要以草炭、蛭石或珍珠岩等为吸附剂，由于有效期较长和菌数较高目前已为大多数生产厂家采用。并已成为当代微生物肥料生产的主要剂型。灭菌的草炭菌剂优于未灭菌的草炭菌剂'，在低温条件下储存的根瘤菌存活率更高。颗粒菌剂是将根瘤菌液或浓缩液喷在草炭、多孔石膏、方解石或白云石颗粒上制作而成，特别适合于机械播种或在种子拌有化学药剂时使用。液体菌剂是将液体