苜蓿根瘤菌的发酵工艺优化.pdf

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1、北方农业学报2016,44(4):53~55JOURNALOFNORTHERNAGRICULTUREdoi:10.3969/j.issn.2096-1197.2016.04.12苜蓿根瘤菌的发酵工艺优化111212闫洪雪,刘露,李丽,赵宏涛,张鹏鹏,梁文辉(1.青岛明月海藻集团有限公司,海藻活性物质国家重点实验室,山东青岛266400;2.青岛明月蓝海生物科技有限公司,山东青岛266400)摘要:试验对1株苜蓿根瘤菌M2进行了培养条件及发酵配方的优化。通过设置不同的温度、pH值、转速,并调整发酵配方,得到最适发酵工艺:最适温度为30℃,最适pH值为灭菌前7.5,最适转速为180r/min。经进

2、一步调整配方后,菌数可稳定在90×108cfu/mL。关键词:苜蓿;根瘤菌;条件优化;配方中图分类号:S541.9;Q939.114文献标识码:A文章编号:2096-1197(2016)04-0053-03OptimizationofthefermentationconditionsofAlfalfaRhizobia111212YANHongxue,LIULu,LILi,ZHAOHongtao,ZHANGPengpeng,LIANGWenhui(1.StateKeyLaboratoryofBioactiveSeaweedSubstancesQingdaoBrightmoonSeaweedGro

3、upCo.Ltd,Qingdao266400,China;2.QingdaoMingyueBlueOceanBio-technologyCo.Ltd.,Qingdao266400,China)Abstract:ThisresearchcarriedoutthecultureconditionsandfermentationformulaoptimizationofalfalfarhizobiaM2.Bysettingthedifferenttemperature,pH,speed,andadjustingthefermentationformula,wegottheoptimalferment

4、ationprocess.Theoptimaltemperaturewas30℃,theoptimumpHwas7.5beforesterilization,theoptimalrotatespeedwas180r/min.Afterfurtherformulaadjustment8,thebacteriumnumberwasstableat90×10cfu/mL.Keywords:Alfalfa;Rhizobia;Conditionsoptimization;Formula[8-9]根瘤菌是一类革兰阴性菌,这类菌广泛的分布开发利用进行了大量探索。本研究对豆科植物根于土壤中并能与豆科植物共生,

5、通过侵染豆科植物瘤菌的发酵工艺进行优化,不仅能够降低生产成本、根部形成根瘤,固定空气中的分子氮,可为植物提供提高产量,还可减少工业氮肥施用量,减轻环境污[1][10]充足的氮素营养,还可降低因施用化肥引起的环境染,具有重要的经济、生态效益。污染。土壤中氮素70%来自生物固氮,而根瘤菌与1材料和方法豆科植物的共生固氮体系所固定的氮量就占到了约[2-3]总量的65%。草产业在国民经济和农牧业发展中1.1菌种[4]起基础性作用,紫花苜蓿是豆科植物,因具有广泛本研究所用菌种M2为本实验室自行筛选鉴定的适应性和优良的生态效应,品质优良且产量高,在得到,液体菌种20%甘油-20℃保存。[5-6]我国的农牧

6、业中占有重要地位。苜蓿根瘤菌这一1.2常用仪器共生固氮体系的稳定高效是栽培苜蓿获得高产的关电热恒温培养箱(韶关市泰宏医疗器械有限公[7]键因素。随着现代生物技术的发展,科学家对苜蓿司,LRH-150B)、超净工作台(苏净集团苏州安泰空根瘤菌的研究越来越深入,从单纯的固氮领域延伸气技术有限公司,SW-CJ-2F)、电热旋转式恒温摇床至生理、生化、生态领域,同时也对固氮菌剂、菌肥的(江苏太仓市实验设备厂,THZ-D)、涡旋振荡器(澳收稿日期:2016-04-07基金项目:国家科技部星火计划(2010GA741050)作者简介:闫洪雪(1988—),女,工程师,硕士,主要从事微生物菌剂、菌肥的研发工

7、作。54北方农业学报44卷门市其林贝尔仪器制造有限公司)。601.3试剂50L蔗糖、酵母粉、豆饼粉、甘露醇、氯化钠、KHPO、/m4024fuc80KHPO、MgSO·7HO、CaCO、NaOH、HCl、pH试纸。13024423/×数201.4基础培养基配方菌10YMA培养基:甘露醇10g/L,酵母粉0.8g/L,氯0化钠0.1g/L,KH2PO40.25g/L,K2HPO40.25g/L,26

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