根瘤菌培养基的优化和剂型的比较研究

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1、万方数据·14·微生物学通报根瘤菌培养基的优化和剂型的比较研究*吴红慧周俊初“(华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070)2004年31(2)摘要：以费氏中华根瘤菌(＆加也切抗啪加以)}玎旧1和大豆慢生根瘤菌(研耐mi∞6i㈣伽眦c啪)uSDAllO作为供试菌，进行nn、TY、sM、PA和BsE等5种培养基的比较试验。结果表明，两种菌都在BSE中生长速度最快。对usDAllo进行培养基的优化试验，筛选出一种能将生长速度提高2倍左右的优化培养基。制作了供试菌的固体、液体与冻于菌剂，结果表明

2、在3种供试固体剂型载体中，草炭要优于蛭石，蛭石又优于珍珠岩。供试菌在两种液体剂型中的存活率和活菌数均较高，氮气或真空剂型对存活率的影响没有明显的差别。两种冻干菌剂的结果表明，供试菌在冻干过程中的死亡率较高，液氮冻干优于常规冻干。冻干菌剂在储存条件下的存活率为：一20℃>4℃>室温。关键词：大豆根瘤菌，培养基优化，剂型中图分类号：Q93文献标识码：A文章编号：0253．2654(2004)02．0014．06^位mⅡ瓜僵0P玎■ⅡZArll0NANDD女0C【】IANrTYPEoD】ⅥnUHSoNoFR

3、圈亿DBIUMWUHor骅Hui珊OUJun．Ch吼(肠，，如如诫形矿一g丌k砒m胁砌蝴，肺Ⅲb愕船庇z如w‰蚵，慨如n4姗O)Abstract：BsEmediaw鹬scr嘲ed丘姗6ve衄汕aindud咄Ⅶn，TY，SM，PA肌dBSE鹪t}lebestfortIle目哪vtIlofr印resenIatives扛丑in岛Ⅻ舰出im加施}玎岫1∞d助m岍忱航m卸∞如ⅢUSDAll0．B∞edonm～，oneoptiIllizedⅡ】edi哪w罄db妇洫ed丘咖叫山08听dtesIs．Accordirl

4、gtosu而valpefc啦lta萨，00ncd虹砒edHqIlidty]pew鹪pmvedt0bet}lehi曲estam叽gsolid，liqlIid舭d‰driedilIocIll锄ttyp鹤tested．P髓tw幽betIertIl锄v刹cIllite蚰dthel砒lerw鹊bett盯山锄p出te珊I删唱t11rees曲diIloculantca工Iie瑙t皑ted．Fre吆e_士ym既hodw鹊notsIlitablef击t}leproducnon0fI}Iizobiuminocul舭tsi

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6、odI戚ngb优静d】叮pIoe惜8．Thes嘶valpe托即妇铲《岳eezeatEqI】讨面唧1w赫hi出叫d1强m一20℃趴dme0rd盯for抵瞬w鼬-20℃>4℃>ID0mt咖弘啪】re．Key删s：soyb㈨蹦础a，MedillIll咖111izati∞，hocIll舭t接种根瘤菌剂已成为世界各国豆科作物增产的一项技术措施，在许多国家都有大规模的商品菌剂生产和出售，应用面积也不断扩大，为了适应中国大豆根瘤菌剂生产的需求，本研究通过5种培养基的比较和优化试验，得到

7、了活菌数高，生产成本低，适合大量工业发酵的培养基。在古代，农民常用客土法将多年种植豆科作物的老区土壤移到新区，以提高作物的产量【1J，自Beiierinck(1888)首次从豆科植物根瘤中分离出根瘤菌后，用纯培养的根瘤菌剂接种豆科植物已在全世界大多数国家普及，并成为一项重要的农业增产技术措+欧盟国际合作计划课题(N0．IcA4一cr_2001．10056)国家863计划课题(No．200lAA214021)一联系人7rel：02_7—87281685收稿日期：2003．06．11，修回日期：2003—

8、08．30万方数据2004年31(2)微生物学通报施。根瘤菌剂主要有琼脂、固体、颗粒、液体和冻干等5种主要剂型。琼脂剂型是最早应用的菌剂，在上世纪20年代，美国已用草炭菌剂取代了它。固体剂型主要以草炭、蛭石或珍珠岩等为吸附剂，由于有效期较长和菌数较高目前已为大多数生产厂家采用。并已成为当代微生物肥料生产的主要剂型。灭菌的草炭菌剂优于未灭菌的草炭菌剂[2’3]，在低温条件下储存的根瘤菌存活率更高[3]。颗粒菌剂是将根瘤菌液或浓缩液喷在草炭、多孔石膏、方解石或白云石颗粒上制作而成，特别适合于机械播种或在种

9、子拌有化学药剂时使用。液体菌剂是将液体发酵的菌液直接用于根瘤菌接种的剂型。冻干菌剂是用冷冻干燥技术除去细胞水分制成，国外已有商品出售。新近的研究结果表明，蛭石是一种理想的吸附剂HJ，蛭石原料在我国分布广泛，价格低廉，适于在根瘤菌剂生产上推广应用。根瘤菌在珍珠岩中存活率较高，也可以作为载体应用幅J。1材料与方法1．1材料1．1．1供试菌种：分别为费氏中华根瘤菌(

10、si加m鼬i啪触如)HN01，本实验室保存；大豆慢生根瘤菌(研呐他洳6i啪．枷梳啪)usDAl