荧光标记及其在高效液相色谱中的应用进展

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1、第一章荧光标记及其在高效液相色谱中的应用进展11.前言12.国内外研究现状62.1.高效液相色谱(HPLC)62.1.1.高效液相色谱的发展62.1.2.质谱(MS)及液相色谱一质谱连用(HPLC-MS)的发展和应用72.2.荧光82.2.1.荧光现象82.2.2.荧光原理82.2.3.影响荧光强度的因素92.2.4.荧光量子效率112.3.化学衍生法及其分类112.3.1.化学衍生法112.3.2.化学衍生法分类112.3.2」.柱前衍生化112.3.22柱后衍生化122.3.3.荧光标记122.4.荧光标记在高效液相色谱中的应用132.4.1.对竣酸类化合物的标记1

2、32.4.1.1.漠代香豆素类132.4.1.2.重氮甲烷类142.4.13联胺类142414胺类142.4.1.5.醇类152.4.16磺酸酯类152.4.2.对氨基类化合物的标记152.4.2.1.5■二甲氨基蔡・1■磺酰氯(DNS-C1)152A.2.2.4■氟・7■硝基-2,1,3-苯并恶呼(NBD・C1)172.423.9■口丫噪基异硫鼠酸酯(PITC)172.4.2.4,荧光胺172A2.5.邻苯二甲醛(OPA)182A2.6.9■茹甲基氯甲酸酯(FMOC)182A2.7.6■氨基唾咻基・N■琥珀酰亚胺碳酸酯(AQC)193・选题思想和主要研究内容20第二章

3、荧光标记试剂的设计合成与表征221.引言222.苯并卩丫唏酮类荧光标记试剂的合成及表征222.1.合成反应概况图222.3.仪器232.4.苯并叶呢酮・9■乙基对甲苯磺酸酯的合成232.4.1.3•氨基・2•蔡甲酸的合成232.4.2.3・N■苯基・2■蔡甲酸的合成231.3.1.苯并叮噪酮的合成241.3.2.苯并叮噪酮・9■乙醇的合成241.3.1.苯并叮喘酮・9•乙基对甲苯磺酸酯的合成242.5.苯并叮噪酮・9■乙酸的合成242.咪哇类荧光标记试剂的合成及表征253.1.合成反应概况图2532试剂252.3.仪器252.4.2-（2-（l-tE基）■苯并咪哩）■乙

4、基■对甲苯磺酸酯（PBITS）的合成252.4.1.2-（1-^基）苯并咪哇的合成263.42合成2-（2-（l-tE基）苯并咪啤）■乙醇263.4.3.合成2・（2・（1•花基）•苯并咪咄）•乙基•对甲苯磺酸酯263.小结26第三章两种荧光标记试剂BAETS和PBITS用于脂肪酸的高效液相色谱-质谱分析27第一节绿色荧光分子苯并口丫唳酮-5-乙基对甲苯磺酸酯（BAETS）用于脂肪酸标记及质谱鉴定281・实验部分281.1.仪器与试剂281.2.实验方法281.2.1.标准溶液的配制281.2.2.标准品的衍生过程281.2.3.色谱与质谱条件281.2.4.椿树木耳中

5、游离脂肪酸的提取292.结果与讨论292.1.BAETS光谱性质292.1.1.紫外光谱292.1.2.荧光光谱292.1.3.质谱302.2.质谱增敏机理302.3.衍生条件的优化3224标准品的色谱分离及质谱鉴定331.1.线性冋归方程、检出限及重现性372.实际样品测定383.小结39第二节2-（2-（1-芷基）-苯并咪砂-乙基-对甲苯磺酸酯（PBITS）用于狼毒根中游离脂肪酸荧光标记及质谱鉴定401.实验部分401.1.仪器与试剂401.2.实验方法401.2.1.标准溶液的配制401.2.2.标准品的衍生过程401.2.3.色谱与质谱条件401.2.4.狼毒根

6、中游离脂肪酸的提取412.结果与讨论411.1.2-（2-（l-tE基）■苯并咪呼）■乙基■对甲苯磺酸酯的稳定性与光谱性质411.2.衍生条件的优化411.1.标准品的色谱分离及质谱鉴定421.2.线性回归方程、检出限及重现性442.实际样品测定453.小结46第三节荧光衍生试剂2-(2-(1-芷基)-苯并咪呼)-乙基对甲苯磺酸酯对长链脂肪酸(C2O-C3O)标记及质谱鉴定481.实验部分481.1.仪器与试剂481.2.实验方法481.2.1.标准溶液的配制481.2.2.标准品的衍生过程481.2.3.色谱与质谱条件481.2.4.狼毒根中游离脂肪酸的提取492.结

7、果与讨论492.1.衍生条件的优化492.2.标准品的色谱分离及质谱鉴定502.3.线性回归方程、检出限及重现性523.实际样品测定534.小结53第四节荧光衍生试剂苯并口丫唳酮-5-乙基对甲苯磺酸(BAETS)用于对长链脂肪酸(C2o-C3o)标记及质谱鉴定551・实验部分551.1.仪器与试剂551.2.实验方法551.2.1.标准溶液的配制551.2.2.标准品的衍生过程551.2.3.色谱条件551.2.4槐树木耳中游离脂肪酸的提取552.结果与讨论562.1.衍生条件的优化562.2.标准品的色谱分离572.3.线性回归方程、检