东北刺人参遗传多样性的rapd分析

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1、万方数据第47卷第6期2008年6月湖北农业科学HubeiAgriculturalSciencesVol。47No．6Jun．，2008东北刺人参遗传多样陛的RAPD分析高日，廉美兰，吴松权，朴炫春(延边大学农学院，吉林龙井133400)摘要：应用RAPD技术对7份来源于不同区域的东北刺人参进行了分析，从100条随机引物中筛选出16条引物，共扩增出117条谱带，其中51条为多态带，多态性比率为43．62％，其多态性比率较低。系统聚类分析将7份东北刺人参居群分为2大类群，长白山老岭山脉的东北刺人参居群聚为一类。长白山主峰南侧的东北刺

2、人参居群聚为一类。东北刺人参总体较低的遗传多样性是导致其濒危的原因之一。关键词：东北刺人参；聚类分析；RAPD中图分类号：$567．5+3；Q503文献标识码：A文章编号：0439—8114{2008)06—0627也RAPDAnalysisofGeneticDiversityforEndangeredop／panaxelatusGAORi，LIANMei-lan，W1JSong-quan，PIAOXuan—chun(A鲥culturalCollegeofYanbianUniversity，Longjing133400，Jilin

3、，China)Abstract：Inthisstudy，7op加删elatussampliesfromdifferentregionsofChangbaiMountainwereanalyzedbyusingRAPDtechniques．16polymorphicprimers，screenedoutfrom100randomprimers，wereusedandproduced117repro-duciblebands．Ofthem，51bands(43．62％)werepolymorphic．Byclusteranalysis

4、thegermplasmusedinthisstudywasdi—videdinto2groups：D．ekausofLaolingMountainforonegroup．0．elatusofsouthofChangbaiMountainfortheother．Thelowergeneticdiversitywasoneofthereasonsof0．elatu．endangermem．Keywords：Dp加删e／atus；clusteranalysis；RAPD东北刺人参(op加观∞elatusNakai)系五加科刺人参属多年

5、生落叶灌木，又名北五加、刺人参，其分布Ⅸ域十分狭窄，全世界只在中国、俄罗斯、朝鲜等3国境内有少量分布⋯，在我国主产于吉林省长自山海拔700，1900m的针叶林带及辽宁东部山区海拔800～1000m的松杉林下。据近几年的调查，整个长白山区小片生长的天然东北刺人参已屈指可数，散生的也已不多陉]，必须采取有效措施予以保护。几年来。国内对东北刺人参的致濒因素和保护对策也进行了一些探讨旧’4]，但尚未见有关东北刺人参遗传多样性的研究报道。遗传多样性的研究不仅有助于了解物种的进化历史和适应潜力．以及探讨物种濒危的机制，同时也关系到能否采取科学

6、有效的措施来保护物种。用于遗传多样性分析的方法很多，其中RAPD方法由于具有简便、灵敏、费用相对便宜、而且可以检测到大量多态位点等优点，已被广泛地用于研究，并获得了满意的结果。本文利用RAPD分子标记法对东北刺人参群体的遗传多样性进行了分析，旨在揭示东北刺人参植物的濒危机制。为更好地保护东北刺人参种群奠定基础。1材料与方法1．1材料野外采集供试东北刺人参植株当年生嫩叶，每地区随机选取10株东北刺人参的叶片，装入保鲜袋，封口，置于样品贮藏箱(由超低温冰袋维持冷藏条件)中带回实验室，一70℃保存待用。各采样地概况和采样数洋见表1。1．

7、2RAPD分析1．2．1基因组DNA的提取DNA的提取采用CTABt5J法，提取DNA后，应用Michemor等的分离群体分组分析法，分别将每个地区的10株DNA样收稿Et期；2008-02—20基金项目：国家自然科学基金项目(30560094)；教育部重点科技项目(205035)作者简介：高13(1982一)，男，吉林抚松人，2005级硕士研究生，(电话)13944769818；通讯作者，朴炫春，(电话)0433—3261756(电子信箱)nyypxc@ybu．edu．cn。万方数据628湖北农业科学2008正袭l东北刺人参采样

8、地及采样敛品等量混合，组成7个不同地区的基因池。1．2．2DNA扩增反应程序反应程序设置为：94℃预变性5min，940C变性45S．370C退火60s．720C延伸90s，40个循环。最后72℃延伸7min。反应体系为(20¨L)：9．8lxLd