多年生黑麦草成熟种子愈伤组织的诱导和植株再生研究

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1、安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2009,37(35):17343-17345,17364责任编辑李婷婷责任校对卢瑶多年生黑麦草成熟种子愈伤组织的诱导和植株再生研究3曾升坚,卞建春,方钲,张冬霞,邹新海(扬州大学兽医学院,江苏扬州225009)摘要[目的]探索多年生黑麦草的愈伤组织诱导和植株再生,为多年生黑麦草的转基因研究奠定基础。[方法]以多年生黑麦草成熟种子为外植体,施以浓度不同的外源激素,探讨不同激素组合对愈伤组织诱导、继代培养以及植株分化的影响。[结果]在附加了8.000mg/L的2,42D,0.02

2、5mg/L的62BA的MS培养基中诱导率最高,达56.42%。愈伤组织经过2~3次继代后分化,分化培养附加了2.0mg/L的62BA的培养基中分化率最高为34.14%,且愈伤组织继代后的状态明显影响分化率。在大量元素减半的MS培养基中附加0.5mg/LNAA进行生根培养,生根率达98%。[结论]建立了高频的遗传再生体系。关键词多年生黑麦草;成熟种子;组织培养;植株再生+中图分类号S5436文献标识码A文章编号0517-6611(2009)35-17343-03CallusInductionandPlantRegenerationfrom

3、MatureSeedsofPerennialRyegrassZENGSheng2jianetal(CollegeofVeterinaryMedicine,YangzhouUniversity,Yangzhou,Jiangsu225009)Abstract[Objective]Theaimwastoexplorecallusinductionandplantregenerationofperennialryegrass,aswellasprovidedthefounda2tionfortransgenicresearchonperenni

4、alryegrass.[Method]Matureseedsofperennialryegrasswereusedasexplantstostudytheeffectsofdifferenthormonecompositionsoncallusinduction,proliferationandplantdifferentiation.[Result]Theresultshowedthattheinductionratea2chieveditshigheston2,42Dof8.000mg/Lcombiningwith62BAof0.0

5、25mg/L,whichwasupto56.42%.Callusweredifferentiatedaftertwotothreesubculture,thehighestdifferentiationrate34.14%wasachievedinthemediumcontainedMSmediumwith62BAof2.0mg/L,andthedifferentiationratewasobviouslyaffectedbythecallusconditionaftersubculture.Therootinducingmedium,

6、containing0.5mg/LNAAandMSmediumwithhalfofmacroelement,gained98%rootinducingrate.[Conclusion]Ahighfrequencygeneticregenerationsystemwasestablished.KeywordsPerennialryegrass;Matureseed;Tissueculture;Plantregeneration多年生黑麦草(perennialryegrass)(下称黑麦草)是重要脯氨酸,300mg/L谷氨酰胺,并附加不同浓

7、度2,42D(2.000、的冷季型禾本科牧草和草坪草,广泛分布于温带地区,其叶4.000、5.000、8.000、10.000mg/L)和62BA(0.025、0.100、片光滑柔软、色泽美丽、绿色期长,分蘖能力强,成坪速度快,0.200、0.300、0.400、0.500mg/L),pH值调节至5.8,每个处是一种优良的草坪草。它既是草坪草、公路护坡的常用草理30个外植体,至少设6个重复。30d后,统计诱导率,将种,也是我国长江中下游及以南地区重要的禾本科饲草,因长出的愈伤转接到继代培养基(2,42D减半的诱导培养基)此,已被广泛应用

8、于公共绿地,家庭庭院,运动场和高尔夫球上培养,21~28d继代1次。置于黑暗处,在(25±1)℃环境场的建设。近年来,已有部分关于利用基因工程培育和改良下培养。[1-3]黑麦草品种的研究报道,而愈伤组织可以

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