产淀粉酶的芽孢杆菌筛选

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1、从土壤中分离产淀粉酶的芽孢杆菌巩固微生物分离纯化、细菌保藏等技能，对所学习过的微生物学实验方法进行综合技能训练培养综合利用微生物学、生物化学等相关知识，自行设计、实施并判断实验结果的能力学习掌握从环境中分离产淀粉酶菌株以及菌株初步鉴定的方法目的实验目的获得产淀粉酶的菌株并对其进行初步的鉴定1、富集培养基：10g的可溶性淀粉，蛋白胨10g，酵母膏3g/L、Nacl2g、蒸馏水1000ml(2倍浓缩100ml/500ml锥形瓶)2、淀粉培养基：可溶性淀粉2g/L蛋白胨10g/L牛肉膏3-5g/LNaCl5g/L

2、PH7.2—7.4`培养基实验材料实验前选取淀粉密集的地方（面粉厂附近）取样品土壤，用塑料袋将样品保存好，留做实验之用。`试验样品处理实验材料`玻璃器皿烧杯（500ml）锥形瓶（250ml）培养皿涂布棒移液枪试管超净工作台、生化培养箱、高压蒸汽灭菌锅、水浴锅、培养接种器具，等`其他设备及仪器一产淀粉酶的芽孢杆菌含量在不同土壤中含量也不同，实验前进行预埋工作，能使土壤中产淀粉酶的细菌含量增加。待实验前取样即可二在只用淀粉充当碳源的选择培养基中，只有能产生淀粉酶利用淀粉的菌体能成为优势菌种，从而得到富集实验原理

3、五在已确定的芽孢杆菌情况下，在菌落处滴加碘夜来观察透明圈情况。三细菌富集一段时间后，生长环境不利，会产生芽孢，再在80-90温度下杀死菌体，可使芽孢得到富集配无菌水，并将其分装到7个试管中,每只9ml。（7个管）目的菌株的富集1、取10g土壤加入250ml烧杯中，再加入90ml无菌水,充分震荡，制成土壤混悬液。2、在37摄氏度摇床（200r/min）培养箱中培养2~3个小时，使菌体充分扩散到无菌水中。3、在80℃水浴锅中加热10~15分钟，杀灭菌体，使芽孢得到富集.4、静置，取上清至富集培养基的锥形瓶中。在

4、37摄氏度摇床（200r/min）培养箱中培养一天，使菌体富集且产生大量芽孢。将富集后的芽孢菌液上清分别稀释101、102、103、104、105、106、107倍，分别取102、104、105、106、107菌液0.1ml均匀涂布在10个淀粉培养基上，在37摄氏度培养箱培养2天，平板培养基表面便形成了若干分散的单菌落。210-选择性分离在单菌落处滴加碘液，挑取有透明圈的单菌落划线分离，在37的培养箱中培养2天。初筛鉴定1、将单菌落点种落接到淀粉平板上纯培养，在37摄氏度培养2天。2、在培养后的平板上滴加碘

5、液，用直尺测量透明圈的大小。