金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响

《金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、生物技术通报·研究报告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2016,32(8):233-241金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响张鑫涛 唐红萍 赵亮 范里 刘旭平 缪仕伟 谭文松（华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海200237）摘要：旨在深入认识金属离子在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞培养生产单克隆抗体过程中所发挥的作用。综合考察了不同铜离子和锌离子浓度下CHO细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布情况。结果显示，一方面，当培养基中铜离子浓度为120nmol/L、锌离子浓度为50μmol/L时，最有利于CHO细胞的生长和抗体的表达。过高或

2、过低的铜离子和锌离子均对细胞的生长和活性的维持产生了不利影响。另一方面，作为碱性羧肽酶抑制剂和辅因子的铜离子和锌离子对抗体的电荷分布有着重要的影响。当培养基中铜离子浓度为50nmol/L、锌离子浓度为50μmol/L时，最有利于减少抗体的电荷变体，提高主峰含量。过高或过低的铜离子和锌离子均导致了电荷变体的增加，主峰含量的降低。且两者的浓度和比例影响了抗体C末端赖氨酸的酶切过程，进而影响了碱性变体的含量。此外，对铜、锌离子的操作空间进行了初步的研究。金属离子在CHO细胞培养过程中对细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布等方面都发挥着重要的作用。关键词：动物细胞培养；电荷

3、分布；金属离子；单克隆抗体DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.034EffectsofMetalIonsonAntibodyProductionandChargeHeterogeneityinCHOCellCulturesZHANGXin-taoTANGHong-pingZHAOLiangFANLiLIUXu-pingMIAOShi-weiTANWen-song（StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering，EastChinaUniversityofScienceandTech

4、nology，Shanghai200237）Abstract:Theobjectiveofthisworkistogetinsightsintotheroleofmetalionsintheproductionofthemonoclonalantibody（mAb）duringChinesehamsterovary（CHO）cellcultures.Cellgrowth，antibodyproductionandantibodychargedistributionatdifferentconcentrationsofcopperandzincionsduringcell

5、cultureswerecomprehensivelyinvestigated.Itwasfoundthat120nmol/Lcopperionand50μmol/Lzincionweretheoptimalconcentrationsforcellgrowthandantibodyproduction.Excessivelyloworhighlevelsofcopperandzincionsbroughtnegativeimpactsoncellgrowthandviabilitymaintenance.Additionally，copperionandzincion

6、，astheinhibitorandcofactorofbasiccarboxypeptidaserespectively，showedconsiderableeffectsonantibodychargedistribution.Themediumcontaining50nmol/Lcopperionand50μmol/Lzincionwasthemostconducivetothereductionofchargevariantsandtheincreaseofmainspecies.Bothexcessivelyloworhighconcentrationsofc

7、opperandzincionsledtotheincreaseoftheantibodychargevariantsandthereductionofmainspecies.TheconcentrationsandratiosofcopperandzincionsalteredtheenzymaticdigestionatantibodyC-terminallysine，subsequentlyaffectedthecontentofthebasicvariant.Additionally，theworkingspaceofcopper