表达单克隆抗体的cho细胞无蛋白培养基的优化

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1、第27卷第1期高校化学工程学报NO．1、bl272013年2月JournalofChemicalEngineeringofChineseUniversitiesFeb．2Ol3文章编号：1003-9015(2013)01．0096．06表达单克隆抗体的CHO细胞无蛋白培养基的优化刘国庆，陈飞，赵亮，范里，谭文松(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海200237)摘要：在自主研发无蛋白培养基的基础上，考察了氨基酸、维生素和葡萄糖对CHO细胞生长、代谢与抗体合成的影响。结果表明，对培养过程中消耗较多的氨基酸进行补充，虽然不能促进细胞生长，但有利于

2、培养后期细胞活性维持与抗体合成；B族维生素的添加能促进细胞生长并延长培养时间；作为重要的碳源和能源，葡萄糖浓度较高时会抑制细胞生长，而浓度较低时不能有效支持细胞生长与抗体合成，维持其在适当浓度有利于细胞生长并能延长培养时间，从而有利于提高抗体产量。通过合理调整各营养物的浓度配比形成了优化的无蛋白培养基，CHO细胞在该培养基中的最高密度达到52．6×10ceils．mL～，抗体产量达到274mg．L～，与初始培养基相比分别提高了33％和63％。总之，在细胞培养过程中应维持充足且平衡的营养物成分，以有效供应细胞生长与抗体合成的需求。关键词：CHO细胞；单克

3、隆抗体；无蛋白培养基；优化中图分类号：Q813．1文献标识码：ADOI：10．3969／j．issn．1003．9015．2013．O1．016OptimizationofProtein—freeCultureMediumforCHOCellsProducingMonoclonalAntibodyLIUGun-qing，CHENFei，ZHAOLiang，FANLi，TANWen—song(StateKeyLabofBioreactorEngineering，EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shang

4、hai200237，China)Abstract：Basedonaprotein—freeculturemediumwithindependentintellectualpropertyrightsownedbyourlab，theefectsofaminoacids，vitaminsandglucoseoncellgrowth，metabolismandantibodyproductionwereinvestigated．ItWasfoundthatsupplementationofthosemostconsumedaminoacidspromote

5、scellviabilityandantibodyproductioninthelaterstage，howeverthesupplementationdoesn’tpromotethecellgrowthandthecellconcentrationremainsunchanged。ThereasonableadditionofsomeBvitaminsimprovescellgrowthandextendscultureduration．Asanimportantcarbonandenergysource，highconcentrationofgl

6、ucoseinhibitscellgrowth，whilelowconcentrationwillbeineficienttosupportthecellgrowthandantibodyproduction．Itwasdemonstratedthatbymaintainingtheglucoseconcentrationinanoptimalrange，cellgrowthisimprovedandculturedurationisprolonged，whicharefavorableforantibodyproduction．Byoptimizin

7、gthefractionsofnutrientcomponentsinthebasalculturemedium，anoptimalprotein-freeculturemediumforCHOcellsWasdeveloped．ThemaximumviableeelIconcentrationandantibodyproductivityinthatmediumare52．6×lO’cells·mL～and274mg·L一，respectively,whichrepresentanincreaseof33％and63％incomparisonwith

8、thoseinbasalculturemedium．Inbrief,thenutrientsi