《pH对重组CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响》

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1、生物技术通报·研究报告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2015,31(12):256-261pH对重组CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响肖尚 邓崇飞 柯军 鄢成伟 孙文正 杨彬 （广东东阳光药业有限公司，东莞523000）摘要：在1L反应器中探究pH对CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响。在1L反应器中对pH进行探究，实验研究表7明当pH为7.05时最适合CHO细胞生长和抗体表达，在此条件下培养时第9天获得最高细胞密度1.54×10cells/mL，在第11天获得最高抗体浓度1355.71mg/L。p

2、H对pCO2、乳酸积累、抗体的单体含量、电荷异质性和糖基化也有较大影响，当pH在6.95至7.25之间时，高pH培养能够降低乳酸积累和pCO2，但是会导致抗体的碱性峰增加。pH两项培养能够降低细胞活力，从而提高抗体表达量。关键词：pH；CHO细胞；抗体；pCO2；电荷异质性DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.037TheEffectsofpHonCellGrowth，MonoclonalAntibodyExpressionandQualityofaRecomb

3、inantCHOStrainXiaoShangDengChongfeiKeJunYanChengweiSunWenzhengYangBin（SunshineLakePharmaCo.，Ltd，Dongguan523000）Abstract:ItwastostudytheeffectofpHonthegrowth,monoclonalantibodyexpressionandproducequalityofarewmbinantCHOstrain.TheresultsshowedthattheoptimalpHfor

4、cellgrowthandtheproductionofmonoclonalantibody（mAb）was7.05.UnderthispH,a7peakviablecelldensitywas1.54×10cells/mLatday9andthehighestharvestedantibodyconcentrationwas1355.71mg/Laftercultivatingfor11days.Inaddition,pHsignificantlyaffectedtheaccumulationofpCO2andl

5、actateincellcultures,aswellastheexpressedproduct’squalityincludingitsmonomerratio,chargevariantspecies,andglycosylationpattern.WhilepHrangingfrom6.95to7.25,cellculturesathigherpHreducedpCO2andtheaccumulationoflactate,butledthealkalinepeakofantibodyincrease.Cul

6、turesat2setsofpHdecreasedthecellactivity,thereforeincreasedtheexpressionofantibody.Keywords:pH；CHOcell；antibody；pCO2；chargevariants单抗类药物的出现为人类一些自身免疫病、癌此其表达的抗体在分子结构、理化特性和生物学功［4］症等疑难病的诊断与治疗开辟了广阔前景，在为人能方面更接近天然产物。自1996年以来，FDA类健康作出突出贡献的同时也为企业带来非常可观批准的生物技术产品中，有2/3以上

7、是通过哺乳动［5］的收入，已成为近年来销售额最高的一类生物技术物细胞系统生产的。中国仓鼠卵巢细胞（Chinese［1-3］药物。虽然哺乳动物细胞培养技术要求高、抗hamsterovary，CHO）由于具有抗剪切力，易于放大体表达能力低、生产成本高，但具有其它表达系统培养的优势，是目前使用最广泛的哺乳动物细胞表［6］无法取代的优势：能够准确的完成糖基化、折叠、达系统。目前使用最广泛的CHO表达系统是二链内及链间二硫键的形成等一系列翻译后修饰，因氢叶酸还原酶（DHFR）和谷氨酰胺合成酶（Glutamine收稿日期：20

8、15-03-10基金项目：广东省引进创新科研团队计划（201101Y0104990178）作者简介：肖尚，男，硕士研究生，研究方向：动物细胞大规模培养；E-mail：xiaoshang@hecpharm.com通讯作者：杨彬，男，工程师，硕士研究生，研究方向：单抗生产；E-mail：547860796@qq.com2015,31(12)肖尚等：pH对重组CH