pH对重组CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响.pdf

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1、生物技术通报·研究报告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2015,31(12):256-261pH对重组CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响肖尚 邓崇飞 柯军 鄢成伟 孙文正 杨彬 （广东东阳光药业有限公司，东莞523000）摘要：在1L反应器中探究pH对CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响。在1L反应器中对pH进行探究，实验研究表7明当pH为7.05时最适合CHO细胞生长和抗体表达，在此条件下培养时第9天获得最高细胞密度1.54×10cells/mL，在第11天获得最高抗体浓度1355.71

2、mg/L。pH对pCO2、乳酸积累、抗体的单体含量、电荷异质性和糖基化也有较大影响，当pH在6.95至7.25之间时，高pH培养能够降低乳酸积累和pCO2，但是会导致抗体的碱性峰增加。pH两项培养能够降低细胞活力，从而提高抗体表达量。关键词：pH；CHO细胞；抗体；pCO2；电荷异质性DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.037TheEffectsofpHonCellGrowth，MonoclonalAntibodyExpressionandQual

3、ityofaRecombinantCHOStrainXiaoShangDengChongfeiKeJunYanChengweiSunWenzhengYangBin（SunshineLakePharmaCo.，Ltd，Dongguan523000）Abstract:ItwastostudytheeffectofpHonthegrowth,monoclonalantibodyexpressionandproducequalityofarewmbinantCHOstrain.Theresultsshowedt

4、hattheoptimalpHforcellgrowthandtheproductionofmonoclonalantibody（mAb）was7.05.UnderthispH,a7peakviablecelldensitywas1.54×10cells/mLatday9andthehighestharvestedantibodyconcentrationwas1355.71mg/Laftercultivatingfor11days.Inaddition,pHsignificantlyaffectedt

5、heaccumulationofpCO2andlactateincellcultures,aswellastheexpressedproduct’squalityincludingitsmonomerratio,chargevariantspecies,andglycosylationpattern.WhilepHrangingfrom6.95to7.25,cellculturesathigherpHreducedpCO2andtheaccumulationoflactate,butledthealka

6、linepeakofantibodyincrease.Culturesat2setsofpHdecreasedthecellactivity,thereforeincreasedtheexpressionofantibody.Keywords:pH；CHOcell；antibody；pCO2；chargevariants单抗类药物的出现为人类一些自身免疫病、癌此其表达的抗体在分子结构、理化特性和生物学功［4］症等疑难病的诊断与治疗开辟了广阔前景，在为人能方面更接近天然产物。自1996年以来，FDA类健康

7、作出突出贡献的同时也为企业带来非常可观批准的生物技术产品中，有2/3以上是通过哺乳动［5］的收入，已成为近年来销售额最高的一类生物技术物细胞系统生产的。中国仓鼠卵巢细胞（Chinese［1-3］药物。虽然哺乳动物细胞培养技术要求高、抗hamsterovary，CHO）由于具有抗剪切力，易于放大体表达能力低、生产成本高，但具有其它表达系统培养的优势，是目前使用最广泛的哺乳动物细胞表［6］无法取代的优势：能够准确的完成糖基化、折叠、达系统。目前使用最广泛的CHO表达系统是二链内及链间二硫键的形成等一系列翻译

8、后修饰，因氢叶酸还原酶（DHFR）和谷氨酰胺合成酶（Glutamine收稿日期：2015-03-10基金项目：广东省引进创新科研团队计划（201101Y0104990178）作者简介：肖尚，男，硕士研究生，研究方向：动物细胞大规模培养；E-mail：xiaoshang@hecpharm.com通讯作者：杨彬，男，工程师，硕士研究生，研究方向：单抗生产；E-mail：547860796@qq.com2015,31(12)肖尚等：pH对重组CH