丙泊酚对tnf-α诱导血管内皮细胞凋亡及caspase-8表达影响

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1、学位论文独创性声明本人郜字声明，所呈交的学位论文系在导师陈丽教授指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人己用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：ｌ、交回学校授予的学位证书；２、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；３、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。４、本人负责因论文成果不实产生的法律纠

2、纷。论文作者签名：魄年年厶堑日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名：指导教师签名：（本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用）刖吾感染性

3、休克是指由微生物及其毒素等产物所引起的脓毒病综合征伴休克。感染灶中的微生物及其毒素，胞壁产物等侵入血循环，激活宿主的各种细胞和体液系统；产生细胞因子和内源性介质，作用于机体，导致组织细胞缺血缺氧、代谢紊乱、功能障碍、甚至多器官功能衰竭。它是当前危重病患者死亡的主要原因之一。尽管最近几十年在液体复苏、抗生素治疗、生命体征监测和生命支持技术等方面均取得长足进展，对败血症，感染性休克的本质也有了更深刻认识，但其发病率和死亡率依然居高不下。感染性休克发生的根本原因是各种病原微生物的侵入。当病原微生物入侵宿主后，释放出多种致病因子，如革兰阴性菌脂多糖（ＬＰＳ）、革兰

4、阳性菌磷壁酸（ＬＴＡ）和肤聚糖等，进而激活机体的内源性炎性反应，即触发全身性炎性反应综合症（ｓｙｓｔｅｍｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅｎｅｃｒｏｓｉｓｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＳＩＲＳ）。各种炎性介质的释放是ＳＩＲＳ的主要特征，肿瘤坏死因子ａ（Ｔｕｍｏｒｆａｃｔｏｒ－ａｌｐｈａ，ＴＮＦ—ａ）是此期间所产生的最重要细胞因子之一，它所引起的血管内皮细胞凋亡严重影响循环系统并且加重休克。凋亡蛋白酶ｃａｓｐａｓｅ一８是细胞凋亡时所产生的～种半胱氨酸蛋白酶，与凋亡的关系最为密切，在细胞凋亡中起执行凋亡的作用。丙泊酚作为一种静脉麻醉药，具有起效快，作用时间短，苏

5、醒迅速而完全，不良反应少等优良特点．而被广泛用于临床各科手术麻醉及镇静治疗。它可直接清除自由基，抑制细胞线粒体膜通透性转换孔（ＭＰＴ）开放．抑制脂质过氧化反应＇调节钙离子平衡，降低组织氧耗，并可增加细胞内谷胱甘肽含量。从而直接阻断凋亡发生的生化反应。本研究采用人脐静脉血管内皮细胞株体外培养技术，建立血管内皮细胞凋亡模型，旨在观察不同浓度的丙泊酚抑制血管内皮细胞凋亡的作用，进一步探讨丙泊酚的保护作用机制。材料与方法１、材料１．１实验用细胞：人脐静脉血管内皮细胞株购自南京凯基生物有限责任公司。１．２主要设备：Ｃ０２培养箱超净工作台苏洲汉达工业自动化有限公司Ｏｌ

6、ｙｍｐｕｓＣＫ－４０倒置显微镜日本ＴＫＯ光学仪器株式会社ＴＧＬｌ６Ｇ台式高速离心机ＦＣＳ－－Ｃｌｉｂｕｒ流式细胞仪Ｍｉａｓ－－２０００图像分析系统上海医用分析仪器厂ＢｅｃｔＯｎ—Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ四川川大智胜软件股份有限公司山西医辩丈学硬士学位论文１．３药物及试剂：试剂名称丙泊酚（得普利麻）．生产厂家ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ公司，批号是ＤＸ３４７肿瘤坏死因子ａ（ＴＮＦ．Ⅱ）ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ公司ｃａｓｐａｓｅ一８Ａｂ一４抗体美国ＬＡＢＶＩＳＩＯＮ公司Ｐｖ－６００ｌＤＡＢ试剂盒ＡｎｎｅｘｉｎＶ试剂盒ＤＭＥＭ培养液胎牛血清胰蛋白酶细胞培养瓶六孔细胞培养板北京中杉

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8、蓝染色少量细胞悬液记数活细胞在９５％以上。根据倒置显微镜下细胞呈单