丙泊酚对新生鼠大脑皮层神经元存活及凋亡的影响

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1、万方数据重庆医科大学学报2010年第35卷第8期(JournalofChongqingMedicalUniversity2010.V01.35No.8)一1175一基础研究文章编号:0253—3626(2010)08—1175-04丙泊酚对新生鼠大脑皮层神经元存活及凋亡的影响杨坤,金先庆,陈廷福,赵丽华(重庆医科大学附属儿童医院普外科,重庆400014)【摘要】目的:探讨丙泊酚对新生鼠大脑皮层神经元存活及凋亡的影响。方法:取新生1d内的SD(Sprague—dawley)大鼠的皮层神经元。培养6d。应用免疫细胞化学法及电子显微镜鉴定神经元,用不同浓

2、度的丙泊酚作用神经元不同时间。四甲基偶氮唑蓝(M,lTr)法测细胞存活率,TUNEL染色法测细胞凋亡指数,Western—blot免疫印记检测Cleaved—caspase3蛋白的表达。结果:丙泊酚作用12h后.细胞存活率在6个组中无明显变化,作用24h及48h后,较高浓度组细胞存活率降低趋势明显。且较高浓度作用于神经元24h后凋亡指数及Cleaved-caapase3蛋白的表达均呈浓度依赖性增高(户如.05)。结论:高浓度长时间丙泊酚作用于大脑皮层神经元可降低其存活力和促进细胞凋亡,这一结论对临床儿童麻醉用药有指导意义。【关键词l丙泊酚;皮层神经

3、元;细胞存活率;凋亡;TUNEL;Cleaved—caspase3【中国图书分类法分类号】R971+.2【文献标识码】A【收稿日期】2010-03一18EffectsofpropofoloncellviabilityandapoptosisinprimaryculturedcorticalneuronsofnewbornratsYANGKun.etal(DepartmentofGeneralSurgery,theChildren’sHospital,ChongqingMedicalUniversity)【Abstract]Objective:Toi

4、nvestigatetheeffectsofpmpofoloncellviabilityandapoptosisinprimaryculturedcorticalneuronsofnewbornrats.Methods:Primaryculturewaspreparedfromnewbornrat,andculturedfor6days.ImmunocytochemiealandelectronicMicoscopicmethodswereusedtoidentifytheculturedneurons.CeUsweretreatedbypmpof

5、olwithdifferentconcentrationsandatdifferenttimes.Theeffectsofpmpofolonneuronswereevaluatedbycellviability(MrIrI.assay)andmarkersofapoptosis(TUNELcellstainingandWestern-blotofCieaved-caspase3).Resu/ts:Therewerenosignificantdifferencesincellviabilityamongthesixgroupsafter12h,whe

6、reashishconcentrationofpropofolcausedallincreaseinneuronalcellviabilityafter24hand48h.Propofolincubationfor24htriggeredapoptosisontheneurons(P<0.05)andupregulatedCleaved--easpase3ofneuronsinaconcentrationdependentmanner(P

7、oncentrationsignificantlydecreasedthecellviabilityandpromotedthecellapoptosis.Thepresentresultsofferedguidanceforchildrenanesthesiainclinic.【Keywords】Pmpofol;Corticalneurons;Cellviability;Apoptosis;TUNEL;Cleaved-caspase3近年来,丙泊酚由于起效快,消除迅速和不良反应少等优点而成为d、,JL#b科手术中最常用的全麻药之一。但近期的一系列

8、研究表明,拮抗N一甲基D一天(门)冬氨酸(NMDA)受体或过度兴奋1一氨基丁酸A型(GABA。)受体的全麻药可触发处在快速

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