丙泊酚不同作用时间对新生大鼠离体海马神经细胞凋亡的影响

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1、贵阳医学院2013年研究生学位论文《中国图书资料分类法》单位代码：10660分类号：614学号：S100369贵阳医学院2013届临床医学硕士专业学位材料(临床论文部分)丙泊酚不同作用时间对新生大鼠离体海马神经细胞凋亡的影响研究生：滕键导师：高鸿（教授）杨剑（副教授）年级：2010级专业：麻醉学2013年5月26日贵阳医学院2013年研究生学位论文目录摘要„„„„„„„„„„„„„„第01页略缩词表„„„„„„„„„„„„„第03页前言„„„„„„„„„„„„„„第04页材料与方法„„„„„„„„„„„„第06页结果„„„„„„„„„„„„„„第12页讨论„„„„„„„„„„„„„„

2、第21页讨论„„„„„„„„„„„„„„第24页参考文献„„„„„„„„„„„„„第25页致谢„„„„„„„„„„„„„„第28页英文摘要„„„„„„„„„„„„„第29页论文原创性声明„„„„„„„„„„第31页综述„„„„„„„„„„„„„„第32页附：临床能力考核有关材料：临床轮转考核表(按时间顺序)学术活动情况表(按时间顺序)临床能力考试及学位答辩情况表贵阳医学院2013年研究生学位论文丙泊酚不同作用时间对新生大鼠离体海马神经细胞凋亡的影响专业：麻醉学研究生：滕键导师：高鸿教授、杨剑副教授摘要目的：以体外培养的新生大鼠海马神经细胞为研究对象，选用不同作用时间，丙泊酚对其进行药

3、物干预，研究其对新生大鼠离体海马神经细胞凋亡的影响。方法：原代培养新生大鼠海马神经细胞：健康出生7d的符合国家二级动物标准的SD新生大鼠海马神经细胞，体外培养48h后用含1%N2(神经生长因子)添加剂DMEM/F12培养基全量换液，以后每3d半量换液，培养至第7d，取部分正常培养的细胞进行NSE免疫组织化学染色，鉴定为海马神经细胞后进行如下实验。分组与药物处理：采用随机数字方法，将其随机分为8组。P1、2、3、4组为丙泊酚药物处理组，丙泊酚处理终浓度为12ug/ml，培养至第7d的神经细胞分别进行3h、6h、12h、24h干预，后换成细胞完全培养基继续培养24h；C1、2、3、4组为

4、对照组，不作任何处理，各组培养结束时间分别对应P1、2、3、4组。培养结束后进行各组指标的测定：（1）MTT酶标法检测细胞存活率；（2）Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率；（3）HE染色光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果：（1）海马神经细胞存活率：C1、2、3、4组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；P1组与C1组相比，P2组与C2组相比,细胞存活率差异无统计学意义（P＞0.05），P3组与C3组相比，细胞存活率差异具有统计学意义（P＜0.05），P41贵阳医学院2013年研究生学位论文组与C4组相比，细胞存活率具有显著差异性（P＜0.01）；丙泊酚处理组神经

5、细胞存活率随着药物处理时间的增加而下降，P2组与P1组相比，细胞存活率差异无统计学意义（P＞0.05）；P3组与P1组，P3组与P2组相比，细胞存活率差异均具有统计学意义（P＜0.05），P4组与P1组，P4组与P2组、P4组与P3相比，细胞存活率均有显著差异性（P＜0.01）。(2)海马神经细胞凋亡率：C1、2、3、4组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；P1组与C1组相比，P2组与C2组相比，细胞凋亡率差异无统计学意义（P＞0.05），P3组与C3组相比，细胞凋亡率差异具有统计学意义（P＜0.05），P4组与C4组相比，细胞凋亡率具有显著差异性（P＜0.01）；丙泊酚处理组

6、细胞凋亡率随着药物处理时间的增加而升高，P2组与P1组相比，细胞存活率差异无统计学意义（P＞0.05）；P3组与P1组，P3组与P2组相比，细胞凋亡率差异均具有统计学意义（P＜0.05），P4组与P1组、P4组与P2组、P4组与P3组相比均有显著差异性（P＜0.01）。（3）海马神经细胞HE染色形态学变化：P1组与P2组和C1、2、3、4组海马神经细胞形态基本正常，胞体饱满、细胞核清晰可见，胞质透亮、折光度强有明显立体感，突起增粗增长；P3组与P4组海马神经细胞形态均有不同程度的损伤，P4组更为显著，细胞体积变小，变圆，细胞皱缩、染色质凝集、边缘化、解离、胞浆致密、突起减少甚至消失，

7、核固缩偏于一侧等细胞凋亡特征。其中P4组凋亡细胞个数最多。结论：丙泊酚抑制海马神经细胞存活并促进其凋亡的作用与时间有关，作用时间越长，其促进凋亡的作用越明显。关键词：丙泊酚；海马；神经细胞；细胞凋亡；新生大鼠2贵阳医学院2013年研究生学位论文缩略词表英文缩写英文全称中文全称DMEM/F12Medium/F12(1:1)F-12培养基DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜ddH20Doubledistilledwater双蒸水GABAGamm