《ATPTCP药敏检测》PPT课件

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1、ATP-TCA与化疗药物选择第四军医大学肿瘤研究所筛选药物——筛选方案周期特异周期非特异不同机理卵巢癌原发部位、大网膜转移及腹水药敏检测结果大网膜转移腹水原发灶形态/行为：侵袭能力、生长速度、对激素的反应、对抗癌药的敏感性、免疫原性等方面差异异质性：变变变050100150200250020406080100ATP-TCA指导的化疗(n=39)传统化疗(n=17)p=0,0009Weeks%Patients050100150200250020406080100ATP-TCA指导的化疗(n=39)传统化疗(n=17)p=0,0016Weeks%PatientsOverallS

2、urvivalProgressionfreeSurvival引自KurbacherCM,CreeIA,Brucker.AnticancerDrugs.1998,9:51-57传统化疗和ATP-TCA指导的化疗的生存率比较药敏检测方法应该具备——基本条件标本可评价率高检测敏感、客观、可靠体内、外结果一致性高目前主要的药敏检测方法及问题集落形成法（HTCA）标本可评价率低，仅有40~70％。实验周期长，需要4周以上测试药物种类和数量有限操作繁琐，难以标准化阳性预测值较低，仅有40～60％四唑蓝比色法(MTT)敏感性较差，最低仅能检测500个细胞量程较小，有效量程在2.0以内细胞

3、毒性差异染色法(DiSC)可适用标本类型不广，目前仅用于血液肿瘤人为判断因素较大，难以推广标本可评价率不高，仅有70～80％阳性预测值较低，仅有70～80％胸腺嘧啶掺入法(3H-T)实验人员接触放射，不利于健康标本可评价率不高，仅有70～80％测试结果仅能反映少量处于增殖相的肿瘤细胞对某些药物的测试结果存在假阴性ATP-TCA检测技术的优点敏感性好可检测10个细胞。其他技术需500个细胞以上；同时动态检测6个剂量下药物对肿瘤的杀伤作用量程宽线性范围为10～105个细胞/孔（96孔培养板）精密度好变异系数（CV）小于国家标准（10%）结果准确整体预测值为86%可评价率高标本可

4、评价率在90%以上高通量检测适合96、384、1536孔板检测分析检测快速完成ATP检测仅需30分钟，其它需1～4h自动化程度高实验数据自动分析，结果直观可靠ATP-TCA药敏检测试剂组成1.组织消化酶6.ATP提取液2.96孔培养板7.荧光酶-荧光素3.选择培养基8.ATP生成抑制剂4.红细胞裂解液9.荧光酶工作液5.ATP标准4.技术流程TumorSingleCellsuspensionMechanicalandenzymaticaldissociationIncubationfor5-7daysAdditionofdrugs/mediumATP-Luminescenc

5、eATPextractionandstabilizationSoftwareEvaluationConstructionofdose-responseplotsATP+Luciferin+O2AMP+2Pi+Photons+OxylaluciferinLuciferase1.设计个体化治疗方案2.筛选有效的联合化疗方案3.老药新适应症的筛选4.新药最佳适应症的筛选5.抗肿瘤药筛选谢谢！