《液相色谱法》PPT课件

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1、第七章液相色谱(liquidchromatography)§7-1概述（1）液相色谱简介（2）液相色谱的发展（3）液相色谱的分类§7-2液相色谱仪（1）液相色谱仪（2）液相色谱仪的流程图（3）液相色谱仪的工作过程（4）液相色谱仪的基本组成系统（5）高压泵1第七章液相色谱(liquidchromatography)（6）梯度洗脱装置（7）进样器（8）色谱柱（9）色谱填料（10）检测器（11）数据处理系统与自动控制单元§7-3新型液相色谱仪简介（1）waters的UPLC（2）岛津高效率HPLC-2010A/2010C型（3）岛津LC-VP系列应

2、用系统离子色谱仪§7-4液相色谱的应用2第七章液相色谱(liquidchromatography)3第七章液相色谱(liquidchromatography)§7-1概述4第七章液相色谱(liquidchromatography)§7-1概述（1）液相色谱简介液相色谱是以液体为流动相的色谱分析方法。英文缩写：LC。按其固定相的不同，又可分为液固色谱（LSC）和液液色谱（LLC）5第七章液相色谱(liquidchromatography)§7-1概述（2）液相色谱的发展在所有色谱技术中，液相色谱法是最早（1903年）发明的，但其初期发展较慢，在

3、液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了迅速的发展。特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高效化和高速化。具有这些优良性能的液相色谱仪于1969年商品化。从此，这种分离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法（highperformanceliquidchromatography，HPLC），也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。6A：高效液相色谱与经典液相色谱方法

4、的比较高速：HPLC采用高压输液设备，流速大增加，分析速度极快，只需数分钟；而经典方法靠重力加料，完成一次分析需时数小时。高效：填充物颗粒极细且规则，固定相涂渍均匀、传质阻力小，因而柱效很高。可以在数分钟内完成数百种物质的分离。高灵敏度：检测器灵敏度极高：UV——10-9g,荧光检测器——10-11g。B：.HPLC与GC的比较分析对象及范围：GC分析只限于气体和低沸点的稳定化合物，而这些物质只点有机物总数的20%；HPLC可以分析高沸点、高分子量的稳定或不稳定化合物，这类物质占有机物总数的80%。流动相的选择：GC采用的流动相中为有限的几种

5、“惰性”气体，只起运载作用，对组分作用小；HPLC采用的流动相为液体或各种液体的混合，可供选择的机会多。它除了起运载作用外，还可与组分作用，并与固定相对组分的作用产生竞争，即流动相对分离的贡献很大，可通过溶剂来控制和改进分离。操作温度：GC需高温；HPLC通常在室温下进行。7第七章液相色谱(liquidchromatography)§7-1概述（3）液相色谱的分类广义地讲，固定相为平面状的纸色谱法和薄层色谱法也是以液体为流动相，也应归于液相色谱法。不过通常所说的液相色谱法仅指所用固定相为柱型的柱液相色谱法。　　通常将液相色谱法按分离机理分成

6、吸附色谱法、分配色谱法、离子色谱法和凝胶色谱法四大类。但有些液相色谱方法并不能简单地归于这四类。8第七章液相色谱(liquidchromatography)§7-1概述（3）液相色谱的分类类型主要分离机理主要分析对象或应用领域吸附色谱吸附能，氢键异构体分离、族分离，制备分配色谱疏水分配作用各种有机化合物的分离、分析与制备凝胶色谱溶质分子大小高分子分离，分子量及其分布的测定离子交换色谱库仑力无机离子、有机离子分析离子排斥色谱Donnan膜平衡有机酸、氨基酸、醇、醛分析离子对色谱疏水分配作用离子性物质分析疏水作用色谱疏水分配作用蛋白质分离与纯化手

7、性色谱立体效应手性异构体分离，药物纯化亲和色谱生化特异亲和力蛋白、酶、抗体分离，生物和医药分析表7－1液相色谱分类9两种最常用的色谱法（一）吸附色谱法（adsorptionchromatography）以吸附剂为固定相的色谱方法称为吸附色谱法。使用最多的吸附色谱固定相是硅胶，流动相一般使用一种或多种有机溶剂的混合溶剂。在吸附色谱中，不同的组分因和固定相吸附力的不同而被分离。组分的极性越大、固定相的吸附力越强，则保留时间越长。流动相的极性越大，洗脱力越强，则组分的保留时间越短。10液-液分配色谱的固定相和流动相是互不相溶的两种溶剂，分离时，组分

8、溶入两相，不同的组分因分配系数（K)的不同而被分离。目前广泛使用的化学键合固定相是将固定液的官能团键合在载体上而制成的，使用化学键合固定相的色谱方法（简称键合相色谱