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《中国新吉细毛羊LHx2基因cDNA克隆与序列分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国新吉细毛羊LHx2基因cDNA克隆与序列分析王沙沙收稿日期:作者简介:王沙沙(1992―),女,吉林人,硕士生,研究方向:基础兽医学。通信作者:孙福亮(1978―),男,吉林人,讲师,在读博士,研究方向:基础兽医学。E-mail:200103055@ybu.edu.cn张立春(1977―),男,吉林人,博士,副研究员,主要从事动物遗传育种研究。E-mail:zhang_lich@163.com基金项目:国家863项目“主要农业动物功能基因组研究”课题“羊经济性状功能基因组学研究”(2013AA
2、102506)资助。,金海国2,曹阳2,鲁承1,张雪梅1,孙福亮1*,张立春2*(1.延边大学农学院,吉林延吉133002;2.吉林省农业科学院畜牧分院,吉林公主岭136100)摘要:此研究以供试羊皮肤组织中提取的总RNA为模板,根据GenBank中登陆的绵羊LHx2基因序列设计引物,通过PCR方法扩增RT-PCR合成的LHx2基因编码区第一链cDNA,回收、纯化反应产物,将目的基因与pMD-18T载体连接、转化,获得阳性重组质粒,成功克隆新吉细毛羊LHx2基因cDNA序列,测序长为1215bp;
3、基因同源性分析各物种同源性均在80%以上;该基因编码405个氨基酸残基,蛋白同源性分析各物种同源性差异较大,蛋白二级结构分析显示LHx2蛋白为疏水性蛋白、柔韧性较高,蛋白结构域分析结果表明克隆的基因较为完整。研究结果为深入研究新吉细毛羊LHx2基因提供理论基础。关键词:新吉细毛羊、LHx2基因、克隆、序列分析CloningandsequenceanalysisofLHx2genecDNAfromChinaXinJifinewoolsheepWANGSha-sha1,JINHai-guo2,CAOY
4、ang2,LUCheng1,ZHANGXue-mei1,SUNFu-liang1*,ZHANGLi-chun2*(1.CollegeofAgricultural,YanbianUniversity,Yanji,Jilin133002,China;2.BranchofAnimalHusbandry,JilinAcademyofAgriculturalScience,Gongzhuling,Jilin136100,China)Abstract:ThetestthroughforRNAextractio
5、ntestsheepskintissueastemplates,primersweredesignedaccordingtoLHx2genesequencepublishedinGenBanksheep,RT-PCRmethodofsynthesisofLHx2geneencodingregionofthefirstchaincDNAusingamplifiedbyPCR,therecoveryandpurificationofthereactionproduct,togettherecombin
6、antplasmids,byputtingthetargetgeneandpMD-18Tvectorclonedandtransformed.ThisexperimentsuccessfullyclonedandsequencedinXinjifinewoolsheepLHx2genecDNAsequence,thelengthis1215bp.Eachspecieshomologywasmorethan80%analysisofgenehomology;thegeneencodinga405am
7、inoacidprotein,homologyanalysisshowedthatthehomologyofthelargerspeciesdifferences,thetwolevelstructureanalysispredictthattheproteinisthehydrophobicandtheproteinflexibilityhigh,domainanalysisshowedthattheclonedgeneiscomplete.Thetestprovidesatheoretical
8、basisforthefurtherstudyofXinjifinewoolsheepLHx2gene.Keywords:Xinjifinewoolsheep;LHx2gene;Clone新吉细毛羊是细毛羊新品种,由新疆畜牧科学院、新疆农垦科学院及吉林省农业科学院培育成功[1],主要特点具有自身独特的被毛细度、稳定的遗传性能[2]。LHx2基因又被称为LH-2,是组成LIM同源结构域(LIMhomeodomain,简称LIM-HD)转录因子家族的成员[3]。LHx2基因包含5个外显