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1、※基础研究食品科学2009,Vol.30,No.0729高纯度牛骨胶原的制备及其结构表征成晓瑜，陈文华，裴显庆，冯平(中国肉类食品综合研究中心，北京100068)摘要：本实验以牛骨为原料，提供了一种经过粉碎、脱脂、脱钙、酶解、盐析、纯化、冷冻干燥等步骤来制备天然牛骨胶原的方法。并采用SDS-PAGE凝胶电泳、紫外吸收光谱、红外吸收光谱、氨基酸含量分析方法，对其进行了结构表征。结果表明，纯化的天然牛骨胶原的纯度达到99%，属于胶原I型([α1(I)]2α2(I))，且完整地保持了胶原的三螺旋结构，两条肽链的相对分子量为α1=123kD，α2=11
2、2kD。关键词：牛骨；胶原；提纯；结构表征PurificationandCharacterizationofBovineBoneCollagenCHENGXiao-yu，CHENWen-hua，PEIXian-qing，FENGPing(ChinaMeatResearchCenter,Beijing100068,China)Abstract：Inthisstudy,high-puritybonecollagenwaspreparedfrombovineboneviasmashing,degreasing,decalcifying,hydroly
3、zingwithenzyme,saltingout,purifyingandfreeze-drying,andthenitscharacterizationwasanalyzedbySDS-PAGEelectrophoresis,ultravioletabsorptionspectrum,infraredabsorptionspectrumandaminoacidcomponentanalysis.Theresultsshowedthatthepurityofthecollagenproductreaches99%;itbelongstotyp
4、eIcollagen([α1(I)]2α2(I))withintegratedthreehelicalstructure,andtherelatedmolecularweightsofitspeptidechainsα1andα2are123kDaand112kDa,respectively.Keywords：bovinebone；collagen；purification；characterization中图分类号：TQ93文献标识码：A文章编号：1002-6630(2009)07-0029-04我国是世界第一肉类生产大国，随着屠宰数量地不1
5、材料与方法断增加，副产物骨也大量产生，目前每年能产生约近1.1材料与试剂2000万吨的畜禽骨，而我国对这一不断增加的庞大的生物资源却缺乏深入的综合开发和利用[1]。充分利用畜禽新鲜的牛棒骨(水分20.9%、蛋白质14.27%、脂肪28.55%、钙14.01%)北京御香苑畜牧有限公司；胃蛋白骨骼资源，不仅可以提高骨的附加值，而且可以增加酶(1:10000)Sigma公司；透析袋(截留分子量为8000～14000D)农民收入，对我国养殖业的发展有巨大地推动作用。美国Viskas公司；其余试剂均为国产分析纯试剂。骨的营养价值丰富，骨中的粗蛋白含量与肉
6、十分接1.2仪器与设备近，且大部分是胶原。胶原占骨中蛋白质总量的80%强力破骨机廊坊惠友机械公司；骨泥磨廊坊惠以上，与明胶、胶原多肽相比，胶原的三螺旋结构使友机械公司；SCR20BA离心机日本日立工机株式会它具有一定的生物活性。胶原蛋白也可以成为重要的生社；FD-6-84D-0冷冻干燥机美国FTSSYSTEM公司；物医学材料，在美容、保健、食品和饲料工业发挥着L-8500高效氨基酸分析仪日本日立公司；UV-3000型重要作用，广泛地应用在手术缝合线、止血海绵、人工血管角膜、神经修复等的临床应用中[2-3]。紫外-可见光分光光度计日本岛津公司；N
7、icolet7500傅立叶变换红外光谱仪美国热电公司；POWERPAC1000目前，国内从骨中提纯胶原的研究很少，使这种电泳仪美国BIO-RAD公司。优质的骨蛋白没有得到充分的利用。本实验主要是提研1.3方法究从牛骨中提取纯度达到99%的胶原的制备方法，并对所得胶原结构进行了探讨。以期为今后骨胶原的生产制1.3.1牛骨基本成分测定备提供参考。水分含量的测定：直接干燥法(GB/T5009.3—2003)；收稿日期：2008-07-14基金项目：“十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAD05A16)作者简介：成晓瑜(1972-)，高级工程师，研
8、究方向为屠宰副产品综合利用。E-mail：chxyey@yahoo.com.cn302009,Vol.30,No.07食品科学※基础研究蛋白质含量的测
