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《酒精复合性肝纤维化大鼠模型的建立及动态观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、234实验动物与比较医学LaboratoryAnimalandComparativeMedicineAug.2008,28(4)酒精复合性肝纤维化大鼠模型的建立及动态观察杨华1,张丽军1,冯艳玲1,彭秀华1,周文江1,2(1.上海市公共卫生临床中心，上海201508；2.复旦大学实验动物科学部，上海200032)[摘要]目的建立大鼠酒精复合性肝纤维化动物模型，观察肝纤维化的动态病变情况。方法雄性SD大鼠随机分成对照组、酒精性肝纤维化模型组。模型组大鼠灌胃酒精、橄榄油、吡唑的混悬液，并间断饲喂高脂饲料,结合微量CCl4腹腔注射的复合方式造模。分别于2、4、6、8周时检测造模大鼠血清丙氨酸转氨酶
2、(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平，并根据肝脏病理切片分析肝脏纤维化病变程度。结果在造模2周末,肝细胞轻、中度脂肪变；4周末，重度脂肪肝，轻度的纤维组织增生；6周末，肝细胞严重脂变，纤维隔形成，中度界面肝炎；8周末，多个假小体形成，达早期肝硬化程度。模型组大鼠的体重、血清ALT、AST、TG、TC水平与对照组比较，差异均有统计学意义。结论运用酒精灌胃为主的复合方式造模，8周内可建立形成不同程度(酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化)的酒精性肝纤维化的动物模型。该模型可靠且复制时间短，肝纤维化进展稳定。[关键词]酒精;CCl4;肝纤维化;早期肝硬化[中图分类号]
3、Q95-33[文献标识码]B[文章编号]1004-8448(2008)04-0234-04近年来，随着人民生活水平的不断提高,我国1材料和方法酒精性肝病的发病率逐渐增多，已成为仅次于病毒[1]1.1实验动物性肝炎的第二大肝病。肝纤维化是酒精性肝病发[2]SPF级雄性SD大鼠40只(180~200g)，由上展至肝硬化的必经阶段，是治疗慢性肝病的关键[3]海西普尔-必凯实验动物有限公司提供[SCXK(沪)环节。因此，建立理想的肝纤维化动物模型，2003-0002]。深入研究酒精性肝病的发病机制，筛选防治该病的1.2材料和试剂有效药物，具有非常重要的意义。无水乙醇、CCl4购自国药集团化学试剂有限
4、以往肝纤维化动物模型多采用单因素制备，公司(本实验用60%酒精由无水乙醇与蒸馏水稀释但周期长、成模率低，本实验采用酒精灌胃为成);吡唑购自瑞典Fluca公司;胆固醇、胆盐购自主，结合微量CCl4腹腔注射的复合方式造模,通过上海源聚生物科技有限公司;橄榄油、猪油为市售;跟踪检测其2~8周的血脂水平的变化,并观察该模型丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶（AST）、的肝脏病理学的动态变化，为研究肝纤维化动物模胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等试剂盒均购自上海科型提供可靠的实验数据。华生物科技股份有限公司。1.3饲料、药物的配制[收稿日期]2008-02-18酒精混悬液配方[4]:60%酒精(6
5、~10ml/kg·d-1)、[基金项目]中国肝炎防治基金会王宝恩肝纤维化研究基金课橄榄油(2ml/kg·d-1)、吡唑(25mg/kg·d-1)混合题(20070026)物;CCl[5]4橄榄油溶液配制:CCl4:橄榄油=1∶3;高[作者简介]杨华(1973-),女,畜牧师,从事实验动物科研工作,脂饲料配方[6]:87.5%基础饲料+2%胆固醇+10%E-mail:yanghua@shaphc.org[通讯作者]周文江(1965-),男,副主任技师,硕士生导师,从事猪油+0.5%胆盐。实验动物学的教学,科研及管理工作,1.4实验方法E-mail:wjzhou@shmu.edu.cnSD大鼠适
6、应性饲养3d后随机分为2组,(1)对Aug.2008,28(4)实验动物与比较医学LaboratoryAnimalandComparativeMedicine235照组8只;(2)酒精性复合性肝纤维化模型组(简称模型组大鼠体重增长缓慢，有的甚至呈负增长，与型组)32只。模型组大鼠酒精混悬液灌胃,2次/d,早对照组比较有显著差异(P<0.01)(表1)。晚各一次。第1周6ml/kg·d-1,第2周8ml/kg·d-1,2.2血脂以及肝功能变化情况第3周10ml/kg·d-1，以后维持此量，直至造模实验各时段及结束时，模型组血清ALT、8周末实验结束。另外第2周起按0.3ml/kg·d-1AST
7、、TG、TC均高于正常组。第2周时，模型剂量腹腔注射微量CCl4橄榄油溶液，2次/周;同组血清ALT与正常对照组比较有差异性(P<0.05)，时隔周间断性饲喂高脂饲料。对照组大鼠给予基础第4周起差异显著(P<0.01)，并随实验时间延长逐饲料饲喂，等量的生理盐水灌胃干预，第2周起步上升。模型组大鼠血清AST、TG与正常组比予以等量的生理盐水腹腔注射。较，4周时无差异性，6周时TG有差异性(P<0.05),1.
