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1、第24卷第4期Vol.24,No.42008年7月July.2008“中国农产品加工技术与产业发展论坛”优秀论文选登(一)PCR及其改进技术在食品检测中的应用ApplicationofPCRandPCRimprovedtechnologyfordetectioninfoods11,21刘辉杨利平张滨11,21LIUHuiYANGLi2pingZHANGBin(1.长沙环境保护职业技术学院,湖南长沙410004;2.湖南师范大学生命科学学院,湖南长沙410081)(1.ChangshaEnvironmentalProtectionandProfessio
2、nalTechniqueCollege,Changsha,Hunan410004,China;2.DepartmentofLifeScience,HunanNormalUniversity,Changsha,Hunan410081,China)摘要:在介绍传统PCR的基础上,简介实时定量PCR、多重PCR产物飞散到空气中形成气溶胶,使PCR假阳性污染成PCR、PCR2DGGE等几种常用的PCR改进技术在食品检测方为可能,而且电泳所用染色剂EB(溴化乙锭)为强烈致癌物面的应用。质,容易危害操作者的健康。近年来,PCR改进技术在食品关键词:PCR改进技术;
3、传统PCR;食品检测检测中的应用研究得越来越多,本文将简介几种PCR改进Abstract:Themethodswererapidlyupgradedfordetectioninfoodswhenthefactorsoffood2pollutionbecamemoreandmorecomplicated.PCRim2技术在食品检测中得应用研究进展。provedtechnologygraduallyreplacetheroleoftraditionalPCRfordetec21传统PCR技术在食品检测中的应用及其tioninfoods.Inthispape
4、r,weintroducedtheapplicationofthreePCRimprovedtechnologiesfordetectioninfoodsonthebaseofintroducingtra2缺点ditionalPCR.ThethreePCRimprovedtechnologiesincludereal2timePCR(PolymeraseChainReaction)技术即聚合酶链式反应PCR,MULTIPLEX2PCRandPCR2DGGE.Keywords:TraditionalPCR;PCRimprovedtechnology;De
5、tectionin技术,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。foods该技术自从1985年问世以来,最早应用于基因克隆和转基因检测,但由于其精确、微量的特点,已经广泛应用到其他领域。随着对一些主要食品微生物遗传性质了解的逐渐深入,近年来,随着我国社会经济的快速发展,人们的生活得许多致病菌的遗传背景进一步明了,PCR技术在食品检测中到很大改善,对食品质量的要求也越来越高。加入WTO以[1]也逐渐显示出其应用前景。近年来,PCR技术在食品检测后,国外对我国出口食品的质量要求也越来越严格。食品安中的应用主要体现在如下几个方面:全是一个重大的世界性
6、公共卫生问题,随着食品生产的工业1.1食源性致病菌的检测化和新技术、原材料、新产品的采用,食品污染的因素日趋复利用PCR方法对病原菌进行检测早在1992年就有报杂,因此食品安全检测的方法也需日新月异。自从1985年[2]道,然而利用PCR技术从食品中检测病原微生物到近几问世以来,PCR(PolymeraseChainReaction)技术因其灵敏、快年才比较广泛应用。Uyttendaele等用PCR方法成功检测出速、操作简便的优点,在食品检测领域具有广泛的应用。但牛肉产品中的大肠杆菌污染。经过几年的发展,利用传统是传统PCR检测技术一直面临着假阳性污染
7、和定量准确度PCR技术能够检测出的病原菌主要有单增李氏菌、肠出血性两大难题,用传统的PCR检测技术都依赖于各种不同类型大肠杆菌0157、H7、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、性小肠耶尔的PCR后处理过程,而这些处理过程很容易使数量巨大的[3,4]森氏菌。1.2食品中成分种类的检测基金项目:长沙环境保护职业技术学院生物化学精品课程建设项目资助(项目编号:HY200785)为了防范某种特定动物病,比如疯牛病,需要鉴定食物作者简介:刘辉(1976-),女,长沙环境保护职业技术学院讲师。中动物成分种类,PCR技术因其简便、灵敏、快速的优点而被E2mail:xinyu
8、erfi@163.com[5]广泛应用。2004年,李林等应用PCR方法鉴别肉骨粉中通讯作者:
