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时间:2018-11-23
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1、PCR技术在食品有害微生物检测中的应用PCR技术在食品有害微生物检测中的应用摘要:食品安全是一个越来越引起人们重视的问题,不仅影响到人们的生活、工作和健康,更是关系到国计民生的大事。目前我们国家虽然制定相关的食品病原菌检验方法,由于检测方法均采用经典、耗时较长的方法,且存在国内试剂供应不配套等问题,很难适应公共卫生事件应急处理快速反应的需要,随着时代的进步,检测方法的先进性、灵敏度、特异性要求都更高。分子生物学检测技术的发展,为微生物食物中毒快速检提供了良好的技术平台。本文详细介绍了PCR技术的原理特点和采用PCR技术检测食品有害微生物的操作
2、流程,同时介绍了当前广泛应用的4种基于PCR技术基础上改进的PCR检测新技术,在此基础上提出了该技术的缺点和在应用过程中存在的问题,同时对其应用前景作了展望。关键词:PCR检测;微生物;食品安全ApplicationsofPCRinthedetectionoffoodbornepathogensAbstract:ThesecurityofFoodisanincreasinglyimportantissuepeoplewillnotonlyaffectpeople'slives,workandhealth,itisalsoamajorevent
3、relatedtothepeople'slivelihood.Althoughourcountryiscurrentlyformulatingtherelevantmethodsoffoodpathogendeteting,theclassicalofalongertime-consumingdetectionmethodsareused,reagentsandsuppliesoftheexistenceofdomesticsupportandotherissues,itisdifficulttoadapttodealwithpubliche
4、althemergenciesneedrapidresponse,withthetheprogressofthetimes,advanceddetectionmethods,sensitivityandspecificityrequirementsarehigher.Detectionofmolecularbiologytechnologyfortherapidseizureoffoodpoisoningmicro-organismstoprovideagoodtechnologyplatform.Thispaperformulatesthe
5、characteristicsofPCRtechniqueandtheuseofPCRdetectionofharmfulmicroorganismsinfoodprocessesdetailly,whilethecurrentwidelyusedPCRtechnologybasedonfourkindsofimprovementsbasedonPCRdetectionofnewtechnologies,inthisbasedonthetechnologyintheapplicationoftheshortcomingsandproblems
6、thatexistintheprocess,whileitsapplicationprospectsarelookedahead.Keywords:PCRinspection;Microbiology;Foodsafety现代食品行业,有很多有害的微生物严重危害食品的品质和人们的健康,甚至会引起一些严重的疾病。而随着经济的迅速发展,对各类食品的需求也日益增大,因有害微生物引起的各类食物中毒事件也逐渐增多。然而,使用传统的检测方法即非选择性和选择性增菌、生长法及血清学鉴定虽然比较准确,但费力、耗时,一般需4~7天才能完成。此外,低水平的病原菌污
7、染,食品加工后导致菌体的“致伤”及食品其它成分的干扰等因素,使得传统的检测方法受到了一定的限制。因此,PCR技术在食品有害微生物检测中的应用急需一些快速、特异、敏感的检测方法,以及时发现致病菌,控制污染及其可能对人体健康产生的危害。分子生物学技术的发展使得许多食品工作者得以寻求更为快速有效的方法来检测病原菌,以期增加敏感性和显著地减少检测时间。其中PCR技术是比较有效,也是当前应用得最为广泛的一种检测方法之一。1.PCR技术原理及特点PCR(PolymeraseChainReaction)即聚合酶链式反应,是1985年美国科学家Mullis发
8、明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法[1],又称为基因的体外扩增法。原理是首先将靶DNA双链加热变性为单链,然后加入两段人工合成的与靶DNA两端正邻近序
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