反相高效液相色谱法快速测定人尿中假尿嘧啶核苷

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1、(四)采用内标法测定甲氰菊酯的定量校正因子Sinica,116023应随时加以校正,否则方法误差将会增加。另外,合Agaschromatographic(GC)methodforthe成副产物的存在并未影响定量分析结果。quantitativedeterminationoffenpropathrin(FPT)in(五)本方法快速、准确和简便易行,因此在工业syntheticproductswasdevelopedwithiso-triacontaneor生产的产率检测和产品质量控制方面是更为合适的docosaneasinternalstandard,FPT,ei

2、therinasynthetic甲氰菊酯定量分析方法。productorinitsemulsifiedform.thismethodisveryeffectiveforthestandarddeviationislessthan0.5%and参考文献thecoefficientofvariationislessthan0.7%.ItwasverifiedthatresultsobtainedbyGCandHPLCarein1〕张颖梅等,色谱,8,257(1990).(收稿日期:1990年12月15日)goodagreement.Thissuggeststhatt

3、heGCmethodismoreQuantitativeDeterminationoftheContentofsuitableforuseinindustrialscaleproductionbecauseofFenpropathriniSyntheticProductbyGasitssimpleequipment,easeofoperation,higherspeedandChromatographyZhangYingmei,ChenHuiin,YuZhenyuaprecision.andGuoHefu,DaliInstituteofChemicalPhysi

4、cs,Academia反相高效液相色谱法快速测定人尿中假尿嘧啶核苷王科太弋昌厚刘平*杨慎英谢国斌*(四川大学化学系,成都,610069人尿中的修饰苷主要是由转移核糖核酸(tRNA癌和肺癌病人的尿样分析结果显示,肺癌病人尿液中酶解产生的。现已发现:在人体癌变组织中从tRNA的假尿苷/肌酐的比值高于正常人2.8倍。t检验结果到假尿苷的转换率比周围正常组织高〔1。癌症患者尿表明:肺癌病人尿液中的假尿苷/肌酐的比值与正常液中的修饰核苷比正常人的含量高,尿液中的修饰核人的比值有非常显著性的差异。苷以假尿苷含量最高,它因不被酶解而成为tRNA代实验部分谢的最终产物。基于以上

5、特点,国外已有许多科学家正进行通过假尿苷作癌症的早期诊断和癌症患者的(一)仪器RP-HPLC系统由Tracor950A型泵放疗和化疗效果的监测等方面的研究。Gehvke和(美国)Tracor970A监测器(美国)和056型记录仪Apell等人的研究尤其引人注目〔12。他们先用硼酸亲日立)组成;柱子:4섲250mm,填料:YWG-C1810m和凝胶柱将尿液中的修饰核苷分离出来,然后用反相(天津试剂二厂)800型离心机(上海手术器械厂);高效液相色谱(RP-HPLC┎测定假尿苷的含量。这种方721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。法虽然灵敏、精确,但测定时间长,需

6、要两步完成,并(二)化学试剂标准假尿苷(美国Sigma,肌且亲和凝胶的制备成本高。后来,Yamamoto等人提出酐、KH2PO4均为分析纯,溶剂是双重蒸馏水。了假尿苷的直接测定方法3。我们在前人研究基础(三)分析条件流速0.95ml/min温度:室温,上,详细研究了影响色谱分离的主要因素,确定了最流动相:0.02molL,KH2PO4的PH为3.45;检测波佳分离条件;并采用标准加入法,确定了尿液中假尿长:254nm;进样:10l;肌酐分析采用分光光度法。苷的特征峰及其回收率。通过建立假尿苷含量对峰(四)标准工作曲线测定精密称取假尿苷,用重面积的标准工作曲线,对

7、样品中假尿苷作定量分析,蒸馏水配成浓度为1.00×10-4mol/L的标准假尿苷用分光光度法同时测定尿中的肌酐,以假尿苷/肌溶液。精密量取这种溶液2.557.5101520l,在酐表示结果,可以对患者随机取样。从正常人、鼻咽上述分析条件下进样后,分别进行高压液相色谱测*分别为90级、91级研究生,现在四川省林科院工作。定。以假尿苷含量作横坐标X,以峰面积作纵坐标Y鼻咽癌患者尿中所含量(表2。对测得数据进行直线回归,得回归方程:A=74.135m表1不同浓度假尿苷回收率+ꬰ0.665。A:峰面积,m:假尿苷含量,=0.9997。结果表明:假尿苷含量在0.3-3nm

8、ol/10l的范围内线性

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