异基因骨髓移植小鼠GVHD模型的建立_扈江伟

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1、军事医学科学院院刊2007年4月第31卷第2期141BullAcadMilMedSci,Apr2007;Vol31No2异基因骨髓移植小鼠GVHD模型的建立1121111*扈江伟,金建刚,王莉莎,宁红梅,俞立权,冯凯,陈虎(1.军事医学科学院附属医院造血干细胞移植中心,北京100071;2.解放军总医院风湿科,北京100853)[摘要]目的:建立异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)模型。方法:将供体C57BL/6雄性小鼠骨髓细胞和脾细胞按不同细胞数混合,输入接受照射后的受鼠雌性BALB/c小鼠,观察受鼠的一般情况、生存期、组织病理6学和嵌合体检查。结果:给予5×10

2、个以上的供者脾细胞的各组小鼠都发生了急性GVHD,但小鼠GVHD出现的67时间不同。结论:成功地建立了异基因骨髓移植小鼠GVHD模型,输入5×10~5×10个供鼠脾细胞均适用于小鼠GVHD防治的研究,可以根据实验需要选择供鼠脾细胞的数量。[关键词]异基因骨髓移植;小鼠;移植物抗宿主病[中图分类号]R457.7[文献标识码]A[文章编号]1000-5501(2007)02-0141-04Amurinemodelofgraft-versus-hostdiseaseinducedbyallogeneicbonemarrowtransplantation1121111*HUJian

3、g-Wei,JINJian-Gang,WANGLi-Sha,NINGHong-Mei,YULi-Quan,FENGKai,CHENHu(1.DepartmentofHematopoieticStemCellTransplantation,AffiliatedHospital,AcademyofMilitaryMedicalSciences,Beijing100071,China;2.RheumatismDepartment,ChinesePLAGeneralHospital,Beijing100853,China)[Abstract]Objective:Toestablis

4、hthemodelofgraft-versus-hostdisease(GVHD)inmicewithallogeneicbonemarrowtransplantation.Methods:BonemarrowcellswerecombinedwithspleencellsofmaledonorC57BL/6miceaccordingtodifferentproportions,thenweretransfusedintofemalepostradiationrecipientBALB/cmice.Generalstate,lifespanandhistopathology

5、oftherecipientmiceanddetectedchimerawereobserved.ResultsandConclusion:Therecipientmice6groupswhichacceptedabove5×10donorspleencellsdevelopedacuteGVHDafterdifferentperoidsoftime.TheGVHD67modelinmiceafterallo-BMTwassuccessfullyestablished.Thetransfusionof5×10-5×10spleencellsmaybeadequatetoes

6、tablishthemurinemodelofGVHDforthepreventionandtreatmentofGVHD.Thenumberofmurinespleencellscanbechosenaccordingtotheexperimentalrequiremen.t[Keywords]allo-BMT;mice;graft-versus-hostdisease异基因骨髓移植(allo-BMT)已经广泛应用于白血病、其温水浴箱(北京市医疗设备厂);倒置显微镜(日本Olym-他恶性肿瘤及自身免疫性疾病的治疗。迄今为止,移植物抗pus);α-MEM培养基,F12培养基

7、(Hyclone公司)。宿主病(graft-versus-hostdisease,GVHD)仍是移植相关死亡1.1.2试剂含抗生素的饮用水(红霉素250mg+庆大霉4的主要原因,是移植的首要障碍。特别是在接受配型完全相素320×10U加入蒸馏水1000ml);基因组DNA提取试剂合的无关供者移植的患者中,常发生最严重的急性盒(Promega公司);特异性扩增小鼠Y染色体sry引物(由本GVHD[1]。因此,如何评价预防和治疗GVHD的效果具有重院段海峰博士惠赠)。要的临床意义。为此,我们用近交系C57BL/6和BA

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