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《杂交_杂交瘤细胞系的建立及其生物学特性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国免疫学杂志年月第卷第期杂交一杂交瘤细胞系的建立及其生物学特性‘王德斌曹明华赵德洪,中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所北京〕仪一摘要研究了以产生抗人小细胞肺癌相关抗原和双特异性抗体的杂交杂交一。。瘤记的方法及双特异性抗体的性质两个具有不同表型敏感拮抗和拮,一抗敏感杂交瘤细胞系经常规方法进行融合最后选出个分泌双特异性抗体的杂交杂交瘤细胞系。,并对其中一个克隆系细胞进行了测示研究结果表明该
2、克隆系细胞培养上清能有效增强细胞对靶瘤细胞的杀伤活性,表明其具有临床应用前景。一关键词人小细胞肺癌杂交杂交瘤双特异性抗体单克隆抗体在临床应用中遇到了一些难于克服双表型杂交瘤亚系的建立’,。之’一的间题尤其用于治疗成效甚微等首先抗亚系的选择,一证明一些识别细胞表面分子例如及细胞悬于含拌的,,,,‘等的单克隆抗体可以使细胞活化并具有细中按不同细胞密度孔接。,,。,胞毒活性由此引入
3、一个单克隆抗体应用的新策略种子孔盘美拜孔后对生长,即通过将抗肿瘤单克隆抗体与抗细胞单克隆抗的细胞纂落进行敏感性测定最后建立抗,,。体连接起来达到特异向肿瘤导向杀伤性细胞的亚系简称为敏感’一。目的这种具有双识别功能的抗体即称双特异双表型亚系的选择,口’,丁性抗体自出现以来已显示其在肿瘤诊断及治疗护敏感细胞悬干含逆转录病毒,拌中广阔的应用前景携带基因的上清中加入我们在完成对自制抗人小细胞肺癌单克隆
4、抗体。置亡,。,孵箱后洗涤去除多余日。一。一。’的临床前期试验基础上利用杂交杂交瘤技术建逆转录病毒细胞悬于中培养置换一。立了分泌抗人小细胞肺癌及双特异性抗体的含陀中进行选择培养存一,,一。杂交杂交瘤细胞学系并对一个克隆系活并生长增殖细胞进行克隆化最后建立了。,的生物学特性进行了研究敏感拮抗亚系材料与方法细胞融合及杂交一杂交瘤的筛选,。培养液根据等人采用的方法稍加改变,一
5、护敏感拮抗细胞与等量野生完全培养液不含或含,·。。一产型杂交瘤细胞混合融合细添加青霉素链霉素常规方法融合一。简称。胞悬于含和拌中接种和细胞培养液含新生牛血清。,一。,。的简称选择培养液含纬新生牛孔盘置孵箱培养大约便可。。进行筛选用结合法初选阳性孔细胞经扩大后再行血清的添加和简。。,一称
6、效应细胞生成液中加增强效应细胞细胞毒活性试验加以确认一,效应细胞的制备一杂交瘤及细胞系正常献血者外周血或扁桃体经产生抗人小细胞肺癌相关抗原单克分离液过尼龙拄分离提取单核细胞。一一,。用含,的培养隆抗体的杂交瘤自制梦产生抗。收集细胞即细胞单克隆抗体的杂交瘤美国博士赠。一,。送人小细胞肺癌细胞系!本所提
7、供细胞结合试验国家自然科学基金资助项目··中国免疫学杂志年月第卷第期””一}l用周生等方法混合等量LTEPSm和LAK细胞。加入融合细胞上清或亲代细胞上清.空白加盐。rn,n。5。水离心1ooo/mismi置30℃水浴25弃部沙眨。叭切二分上清,悬起细胞、镜下计数结合率。结合两个LAK细胞者为结合细胞。结合率>20%者定为.,阳性L7效应细胞导向试验用Clark等}川方法稍加改变。取对数生长期,。‘一三,〔咬一,,护sml细胞”r川一进行C标记标记靶细胞接种96U形,‘一es
8、.:盈10拜1CNT加入‘,‘七孔每孔细胞/100M按设定E幽‘,LAK细胞50川/孔最后向每孔再加入不同的试验6O。叨402030场样品,。3个,曰合l’o减。ou合对照组加培养液50川/孔各试验组设平。、:。℃5行孔CO置37%孵
