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《蛋白酶活化受体1与4在血小板活化中的作用机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHematology2003;11(5):495-498·495·文章编号(ArticleID):1009-2137(2003)05-0495-04·论著·蛋白酶活化受体1与4在血小板活化中的作用机制11韩 悦,Jean2maxPasquet,AlanNurden,阮长耿1苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,苏州215006;UMR5533,CNRS,HopitalCardiologique,Pessac33604,France摘要 为了比较蛋白酶活化受体1和4(PAR1,PAR4)合成肽对血小板膜表面糖蛋白GPIbα表达及细胞
2、骨架的影响,揭示蛋白酶活化受体在血小板信号传递中的作用,选择25μmol/LPAR1与250μmol/LPAR4两类合成肽分别在不同时间段(0-60分钟)活化血小板,应用流式细胞仪测定血小板膜糖蛋白GPIbα及P2选择蛋白的表达,并结合SDS2PAGE与转移电泳技术比较血小板活化前后细胞骨架GPIbα、肌动蛋白、肌球蛋白的变化,同时对膜骨架成分进行GPIbα免疫沉淀分析。结果显示,PAR1与PAR4两类合成肽均可促使血小板活化,其P2选择蛋白水平显著升高,GPIbα表达进行性减少又出现逐渐回升的可逆性变化,各时间段引起的GPIbα改变在两者之间都具有显著差异(P<0.05),其中PAR1首先发
3、生作用,但PAR4维持时间更长。细胞骨架蛋白分析显示肌动蛋白与肌球蛋白协同GPIbα呈现先增加后减少的动态变化。免疫印迹也表明与GPIbα相连的肌动蛋白及肌球蛋白出现可逆性改变。结论:PAR1与PAR4在血小板信号传递过程中发挥了重要作用,它们能各自独立地介导血小板活化,并导致GPIbα逆转,这与细胞骨架的积极参与相关。PAR1起效较快,PAR4维持作用更长久。关键词 血小板活化;蛋白酶活化受体;糖蛋白Ibα;细胞骨架中图分类号 R3311143;R558文献标识码 AMechanismofActionofProtease2ActivatedReceptors1and4inPlatele
4、tActivation11HANYue,Jean2MaxPasquet,AlanNurden,RUANChang2Geng1JiangsuInstituteofHematology,TheFirstAffiliatedHospitalofSuzhouUniversity,Suzhou215006,China;UMR553CNRS,HopitalCardiologique33604,Pessac,FranceAbstractThisstudywasdesignedtocomparetheeffectsofprotease2activatedreceptor1(PAR21)andprotease2
5、activatedreceptor4(PAR24)totheexpressionofplateletsurfaceGPIbαandcytoskeletonreorganization,thentoinvestigatetheroleofPARsinplateletsignaltransmission.PAR1(25μmol/L)andPAR4(250μmol/L)wereusedtostimulateplateletatdifferenttimepoints(0-60minutes),andtheplateletsurfaceGPIbα,actinandmyosinandP2selectinw
6、eredetectedwithflowcytometry,thealterationofGPIbα,actinandmyosinincytoskeletonwascomparedbyWesternblot,themembranecytoskeletonfollowedGPIbαimmunoprecipitationwasanalyzed.TheresultsshowedthatanincreaseofP2selectinandreversibledecreaseofGPIbαexpressionwereobtainedafterplateletactivationbyPAR1orPAR4,an
7、dadifferentkineticsofredistributionofGPIbαwasfoundforthetwopeptidesalloverthetimecourse(P<0105).PAR1actedmorepotentlyandrapidlythanPAR4,buttheeffectofPAR4persistedlongerinthecourseofplateletactivation
