血小板蛋白酶活化受体-1激活后对结肠癌细胞hct-116的趋化作用

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2、成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：菡砼硷曰象月形多年章签师导目录㈣㈥qIMIIlllllllllllY2337267中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文血小板蛋白酶活化受体．1激活后对结肠癌细胞HCT-116的趋化作用前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一5刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·

3、12附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·15讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·19结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22综述CXCLl2／CXCR4／CXCR7趋化轴在肿瘤进展中的作用⋯⋯⋯一26致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·40个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·41中文摘要血小板蛋白酶活化受体．1激活后对结肠癌细胞ItCT．116的趋化作用摘要目的：观察血小板PARl激活后对结肠癌细胞HCT-11

4、6的趋化作用。方法：1以梯度浓度PARl激动剂TFLLR-Ntt2(1gM、3出、5衅、79M、9btM、11州、13州、lSgM、171xM、19bdVl)作用于结肠癌细胞HCT．116，同时设定空白对照组(加入10％胎牛血清培养基)。24h后，用MTT细胞增殖法检测TFLLR-NH2对细胞增殖的影响，以初筛TFLLR-NH2浓度使用范围。2以梯度浓度TFLLR-NH2(O．5出、lgM、3州、10出、30rtM)激活血小板后采用流式细胞术检测血小板表面CD62P表达水平。对照组为静息血小板。3选择梯度浓度PARl激动剂TFLLR-NH2(1gM、3州、5州、79M、9／aM)激活血小

5、板，应用Transwell趋化实验，观察激活后的血小板上清液对结肠癌细胞HCT．116的趋化作用，同时设定空白对照组及PARl未激活的血小板上清液组。同时为了排除激动剂对肿瘤细胞PARl的激活，设置单纯激动剂组观察是否对肿瘤细胞趋化有影响。4选用79lVlTFLLR-NH2激活血小板，取其上清液作用于结肠癌细胞HCT-116，同时设定空白对照组，空白对照组只加10％胎牛血清培养基。在培养箱中孵育24h后，应用流式细胞术检测HCT．116细胞表面CXCR4表达情况。结果：l在MTT细胞增殖实验中lglVl．179lVlTFLLR-NH2对HCT-116细胞的增殖都没有影响，各组所得OD值与

6、空白对照组OD值相比，其差异均无统计学意义(尸>O．05)。而199MTFLLR-N-H2激动剂组的OD值较空白对照组升高(O．682--k0．014VS0．6474-0．291，P<0．05)。据此，初步限定了PARl激动剂TFLLR-NH2的使用浓度应小于19rayl。2分别用0．51*M、lgM、3出、10脚、30州TFLLR-NH2激活血小中文摘要板PARl后采用流式细胞术检测血小板表面CD62P阳性表达率，依次为(33．82士17．96)％、(39．64+19．53)％、(60．99+12．42)％、(55．78+10．49)％、(57．58+11．77)％，明显高于未加激动剂

7、的对照组(14．97+6．28)％，尸