无细胞百日咳攻击菌的制备及液氮保存方法分析

《无细胞百日咳攻击菌的制备及液氮保存方法分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、("微生物学免疫学进展!""%年第+6卷第(期**R?=EHD0HB?=PH=.U--ID=.X@P9!""%，4=.9+6V=9(无细胞百日咳攻击菌的制备及液氮保存方法分析魏辉，曾红，高赞军，柴博雅，槐丽萍，左毅（长春生物制品研究所，长春*(+""#!）摘*要：为了制备无细胞百日咳效价测定用攻击菌并用液氮进行保存，对此方法进行评价。采用原代攻击菌复苏传代后测定细菌浓度，并用蛋白胨水稀释为!%亿个菌,-.，分装冻存管中。放入液氮罐内，并对液氮保存的攻击菌进行相应的检测，用统计软件计算。结果显示，此方法制备的攻击菌与传统

2、的攻击菌无显著性差异，冻后虽攻击菌的毒力有所下降，但都在(""/(""",012的正常范围内，且冻后"、+、#、)、(!月无显著性差异。同批支间差异小，34567。通过此方法制备的攻击菌稳定性好，试验结果符合《中华人民共和国药典》要求，可用于无细胞百日咳的效价测定。关键词：无细胞百日咳攻击菌；液氮保存；方法分析9:中图分类号：8+%’&!文献标识码：;***文章编号：(""6$6#%+（!""%）"($""("$"+!"#$%"%&’()(*%+#,,-,%"$#"&-..’.+/%,,#)0#.&"%’)%)1%)%

3、,2.’.(*$"#.#"3%&’()’),’4-’1)’&"(0#)*!"#$%&，’"()$*+,，)-.’/+01%+，23/45（67/+,87%+#+93&3%32*:;&*4*,&8/4<=*>%839，67/+,87%+(+""#!，67&+/）56.&"%+&：<=>?@>A?@ABCA..@DE@FG?AHDIF@JK=?@LA.IAGH=D=K>=G@DBM=KAB@..I.A?>@?GIFFHFLABBHD@ADJG=>?@F@?L@HGHD.HNIHJDHG?=E@D，GC@=?HEHDA.BC

4、A..@DE@FG?AHDOAF?@B=L@?@JADJE@D@?AG@J，IF@JHDJ@G@?-HDAGH=DB=DB@DG?AGH=D=KGC@FG?AHD9@?-H..H.HG@?ADJFG=?@JHD.HNIHJDHG?=E@DADJGC@DG=J@G@BGHGPMBA.BI.AGH=D=DFGAGHFGHBFF=KGOA?@9A?@JPM

5、IFHDEGC@?=IGHD@-@GC=J9;.$GC=IECGC@G=QHBHGM=KFG=?@JFGAHDOAF?@JIB@JHD.HNIHJDHG?=E@D，HGHFFGH..-AHDGAHD@JHDAD=?-A.?ADE@=K(""G=("""012（-HDH-I-.@GCA.J=F@）9@BGHL@.M，HDAJJHGH=D，LA?HAGH=

6、DFA?@.=O@?A-=DELHA.FHDGC@FA-@PAGBC345679=@HA=KGC@R@=>.@SF8@>IP.HB=K3CHDA”97#28("1.：3CA..@DE@FG?AHDK=?AB@..I.A?>@?GIFFHFLABBHD@；R?@F@?LAGH=DHD.HNIHJDHG?=E@D；;DA.MFHF9**作为无细胞百日咳效价测定攻击用的菌种，长冻存管：&+"#6)!9"

7、-.3=?DHDEUDB=?>=?AG@J，3=?$期以来都是每次试验前现开菌种的方式，这样既麻DHDE，VW(&’+(0AJ@HD0@QHB=烦，又浪费菌种，还有可能造成批间的效力试验差异(9!*保护剂及培养基很大。甚至可能因攻击菌不成立，导致试验失败。甘油：分析纯。这样浪费动物、人力、时间。为此，实验用事先制备蛋白胨水、活性炭半综合培养基和改良包$姜羊攻击菌低温保存的方法来解决这些问题。制备及保血培养基，由长春生物制品研究所培养基室提供。存微生物具有容易变异的特性，因此在保藏过程中，(9+*菌种必须使微生物的代谢处

8、于最不活跃或相对静止的状百日咳攻击菌种株(’+!+由中国药品生物制品态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持检定所提供。生活能力，0@?M$-AD（()6#）曾引证在$(+"T将无生;:方法〔(〕化活性发生。据此可采用液氮保存攻击菌。!9(*攻击菌的制备材料和方法!9(9(*菌种复苏及传代**将菌种在无菌条件下复苏、溶解、混匀