常用菌悬液的制备及保存方法使用期限.doc

常用菌悬液的制备及保存方法使用期限.doc

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1、常用试验用菌种的生物学特征。枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]形态与染色:菌体细短棒状,单个或成链状,两端半圆形,染色均匀,芽孢椭圆形或圆柱形,位于菌体中央,革兰氏染色阳性,能运动。培养特性:a肉汤琼脂平板:菌落表面粗糙,圆形,灰黄色,边缘锯齿状,分离时应挑选粗糙形菌落。b普通肉汤培养基:呈少量浑浊并产生沉淀,在液体表面形成皱状厚膜粘附于试管壁上。C最适宜培养温度30~37℃,生长温度范围:15~35℃,兼性厌氧或需氧。抵抗力:菌体湿热55℃1小时被杀死,芽孢100℃3小时或120℃40分钟被杀死。短小芽孢杆菌

2、[CMCC(B)63202]形态与染色:杆状,革兰氏染色阳性,无荚膜,芽孢偏生,椭圆形有动力。培养特性:平板分离时应挑选光滑菌落,其它与枯草芽孢杆菌相似。藤黄微球菌[CMCC(B)28001或ATCC9341a]形态与染色:球形排列成立体状呈八叠。革兰氏染色为阳性。培养特性:a肉汤琼脂平板菌落为黄色,圆形,光滑,凸出,表面润湿光亮,平板分离时应挑选光滑菌落。b普通肉汤呈黄色沉淀,很少浑浊。c需要氧菌,最适生长温度为25℃。金黄葡萄球菌[CMCC(B)26003]形态与染色:圆球形排列成典型的葡萄串状,肉汤琼脂平板培养

3、多呈短链状或双球状,无鞭毛,不能动,不产生芽孢,革兰氏染色阳性。培养特性:a在28~38℃生长较好,pH生长范围为4.5~9.8,pH7.4左右生长最好。b平板分离时应挑选光滑菌落。大肠埃西菌[CMCC(B)44103]形态与染色:短形杆菌,两端钝圆,无芽孢,革兰氏染色为阴性。培养特性:需氧菌,也兼性厌氧。检定菌的基本要求1.显示临床特点,对抗生素主要组分敏感,对杂质,降压物质及毒性物质无作用或作用很低。2.灵敏、稳定,抑菌圈边缘清晰,测定误差小。3.易于培养、保存,又无致病性。4.与其它国家药典的试验用菌最好一致,

4、便于单位统一。5.常用菌悬液制备时所用溶剂、保存方法及使用期限菌液名称所用溶剂保存方法使用期限枯草芽孢杆菌灭菌水4~8℃冰箱保存1个月短小芽孢杆菌灭菌水4~8℃冰箱保存1个月金黄葡萄球菌灭菌水或0.9%灭菌生理盐水4~8℃冰箱保存3-7天藤黄微球菌0.9%灭菌生理盐水4~8℃冰箱保存7天大肠埃西菌灭菌水4~8℃冰箱保存7天肺炎克雷伯氏菌灭菌水4~8℃冰箱保存半个月标准品的保存与稀释标准品的保存:标准品应置5℃以下保存,安瓿开启后应将标准品转移到小瓶中,将此小瓶封口放在盛有硅胶或氯化钙的干燥瓶内,置5℃以下冰箱中保存。

5、(注:土霉素标准品小瓶放于不加干燥剂的瓶内或有特殊要求的标准品应按要求放置)标准品溶液的配制称量前,自冰箱内取出标准品,放置与室温相同时才能称量。称量:小心开启瓶盖子,用干净不锈钢匙取适量于容量瓶中,精密称定。稀释:按各品种规定方法稀释,标准品溶液于5℃以下冰箱保存,临用前从冰箱中取出放置到室温后按各品种规定方法稀释到所需浓度,标准品溶液使用期限按规定执行,不得任意延长。新配制标准品溶液必须与原来使用的标准品溶液对照测定,其结果不得超过以下规定要求:a≥1000u/mg的品种,不得超过标示值的±1.2%b<1000u

6、/mg的品种,不得超过标示值的±1.5%若超过规定应重新配制标准溶液并用该溶液对上次标准溶液重新标定,分析超过规定要求的原因。

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