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《猪前体脂肪细胞的原代培养》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2005,13(5):649~653·研究论文·猪前体脂肪细胞的原代培养*屈长青张国华陈粉粉赵丽丽杨公社**(西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100)摘要:建立猪前体脂肪细胞原代培养方法,研究猪脂肪组织增生的生物学特征。选用出生7d的仔猪脂肪组织,采用原代消化细胞培养法培养出棱形细胞，该细胞成分均一、生长旺盛和充脂率高。经形态学动态变化观察、MTT比色法、生长曲线及油红O染色提取法测定,证明是功能活跃的前体脂肪细胞,
2、并在体外重现了其增殖的全过程。关键词:猪;前体脂肪细胞;细胞培养;脂肪组织PrimaryCultureofPorcinePreadipocyteQUChang-QingZHANGGuo-HuaCHENFen-FenZHAOLi-LiYANGGong-She**(LaboratoryofAnimalFatDepositionandMuscleDevelopment,NorthwestSci-techUniversityofAgricultureandForestry,Yangling712100,China)Aprimary
3、porcinepreadipocyteculturemethodforunderstandingthepropertiesofhyperplasiaofpigadiposetissuewasestablished.The7-dayoldcrossbredpigwaspurchasedandadiposetissuewasremovedwithsterileinstrumentsfromthedorsalneck,shoulderandbackregions.Usingprimarycellculturemethod,iso
4、latedpreadipocytewerecultured.Thecellswerehighlyhomo-geneousandproliferative,andhadahighdifferentiationrate.Theirdynamicmorphologicalchanges,MTT,growthcurveandextract-ingstainedintracytoplasmiclipidwithoilredO,allverifiedtheirpreadipocyteidentity.Undercontrolledco
5、nditions,thepreadipocytesreplayedtheirhyperplasiaprocessinvitro.Inyoungpigadiposetissue,therewerepreadipocytesthatcoulddifferentiateintomatureadipocytes.porcine;preadipocyte;cellculture;adiposetissue早在20世纪60年代初，国外即有人开始从事1材料和方法脂肪细胞培养的实验工作。前体脂肪细胞的体外培养不仅能完整地认识脂肪组织发生和
6、增生的全过1.1材料程，并且可以直接观察各种因素对这个过程的调控。1.1.1脂肪组织采自本校试验农场种猪场7日目前，已建立起人(王竹晨等，2001)和牛(Asoetal.,龄杂种(!杜洛克!"长白)仔猪颈部、肩胛及背部皮1995，夏成等，2004)前体脂肪细胞原代培养模型，但下。尚未有研究猪前体脂肪细胞培养体系的报道。猪具1.1.2试剂DMEM培养基和!型胶原酶购自有肥胖的自然属性，是肥胖程度最高的肉用家畜，尤Gibco公司；胎牛血清购自杭州四季青公司；牛血清其是我国地方品种猪的主要缺点是沉积脂肪能力白蛋白购自Amersc
7、o公司；其它试剂均为分析纯，强，瘦肉率平均只在40%左右，严重影响其经济价购自西安试剂厂；培养瓶购自Korning公司。值和肉用品质。因此，摸索建立猪前体脂肪细胞培养1.1.3培养基及主要试剂的配制完全培养基：按体系，研究其脂肪沉积与组织发育机理，具有重要的说明取DMEM培养粉5g，NaHCO31.83g，HEPES理论与实践意义。1.2g，加入胎牛血清使其体积分数为10%，四蒸水*基金项目：国家自然科学基金项目(No.30471239)资助。屈长青:男，1972年生，博士研究生。**通讯作者。Authorforcorre
8、spondence.Tel：029-87092430E-mail:.收稿日期：2004-08-26接受日期：2004-11-09650农业生物技术学报2005年定容至500mL。消化液：!型胶原酶100mg，牛血接种方法同1.2.2，根据Ramirez-Z
